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小黑杨,因其生长迅速、高抗逆性强,在东北地区被广泛应用。而小黑杨三倍体是小黑杨和黑小杨杂交的子代,具有适应性广,抗寒性强;生长快,材质好;抗病虫害能力强等特点,但其抗盐能力的强弱研究很少。前人的研究方向主要是对盐胁迫下的小黑杨从形态、生理、生化和分子的角度进行研究,发现了小黑杨的生理和分子机制,但对蛋白质组学的研究很少。而蛋白质作为生命活动的重要的执行者,却被研究的较少。本实验室通过杂交手段获得三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)。三倍体苗期显示出明显的速生性,但是耐盐碱能力还未进行测定分析。本研究以三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)为材料,对盐胁迫处理条件下植株生长性状、生理指标、叶绿素荧光参数及叶片的蛋白质差异蛋白进行测定分析,具体获得以下结果:1.盐胁迫下不同倍性小黑杨杂种无性系生长指标变异分析以小黑杨四倍体(XY4.1)、三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)及小黑杨二倍体(XY)3个无性系为材料,对其盐胁迫下叶绿素含量、叶含水量、叶鲜重、叶干重、茎含水量、茎鲜重及茎干重进行测定,结果表明随着盐浓度的增加,不同无性系叶绿素含量、叶含水量、叶鲜重、叶干重、茎含水量、茎鲜重及茎干重均呈下降趋势,且随着胁迫时间的延长,也均呈现下降趋势;同时发现盐胁迫浓度75mmol/L是无性系最敏感的的盐胁迫浓度。2.盐胁迫下三倍体小黑杨杂种无性系(XY3.2)生理指标变异分析以三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)为材料,对其盐胁迫下10个生理指标进行测定,结果表明10个生理指标(电导率、POD、SOD、CAT、可溶性糖、脯氨酸、MDA、可溶性蛋白、活性氧及质膜H+-ATPase)均呈现先上升后下降的趋势。POD、SOD及H+-ATPase指标在胁迫12天之前均是上升的,超过12天之后均呈现下降的趋势。而电导率、CAT、可溶性糖、脯氨酸、MDA、可溶性蛋白及活性氧是盐胁迫8天前是上升趋势,超过8天后均出现下降的趋势,所以确定盐胁迫的最最适宜天数为8天。3.盐胁迫对三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)叶片叶绿素荧光参数的影响以三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)为材料,对其盐胁迫下叶绿素荧光参数的测定,结果表明盐胁迫下,三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)叶片的Fm、ΦPSⅡ、ETR的均值变化趋势均呈现下降趋势,而NPQ、qN呈的均值呈现逐渐上升的趋势,qP和Fv/Fm的均值呈现单峰趋势。说明盐胁迫可以抑制三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)叶片PSⅡ原初光能转换效率和PSⅡ潜在活性,增加PSⅡ非辐射能量的耗散,且光合系统对盐胁迫的防卫能力增强。4.盐胁迫下三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)蛋白质差异表达分析以三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)为材料,对其盐胁迫条件下叶片差异表达蛋白质进行分析,共鉴定出86个差异蛋白质,不同时间差异蛋白数量不同,盐胁迫第12天差异蛋白最多,达到32个。应用GO功能注释软件分析上述的蛋白功能,具体分为能量代谢、氧化还原、光合作用、信号转导、运输蛋白、抗性蛋白、生物合成与代谢及未知蛋白等8类:其中能量代谢占19%、氧化还原反应占6.9%、光合作用占26%、信号转导占2%、运输蛋白占3%、抗性蛋白占8%、生物合成与代谢占6%及未知蛋白占23%。从上述分析结果说明,三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)受到盐胁迫后,受到影响最大的是光合作用及能量代谢,其次是氧化还原反应。综上所述,首先确定最敏感的盐胁迫浓度为75mmol/L。再以三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)为材料,对其进行75mmol/LNaCl处理,测定生理指标(叶绿素含量、酶活性、荧光特性)的变化。最后对叶片蛋白质差异表达进行测定,分析盐胁迫条件下三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)的蛋白质表达变化,并研究三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)响应盐胁迫的分子机理和提供蛋白水平上的数据和资料,初步揭示三倍体小黑杨杂种无性(XY3.2)耐盐的分子机制。