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目的：细菌性疾病是水产养殖业的头等杀手，其中出血症影响较大，由于抗生素的耐药性，疫苗的方法成为水产业防治疾病的替代途径，但疫苗评价当前主要是依赖抗体及免疫保护力，但由于鱼类生活的特殊性，要有效评价疫苗的效果，需建立一个较为直接、系统综合的评价体系。本文就是对所筛选病原菌的病理组织切片、疫苗开发与评价、抗体的分离纯化进行实验研究，为该病的防治提供理论基础。方法：从患出血病罗非鱼的病灶部位采用血琼脂培养分离出多种菌，经感染宿主并观察病症的方法分离筛选出一株高致性病菌，通过对健康鱼进行不同浓度致病菌的感染试验及定性数据机率分析，确定其对数半致死浓度（LD50）；通过对患病鱼的不同组织器官进行切片病理结构观察确定其病变的部位；采用菌落形态观察、生理生化实验及16S rDNA测序，确定该致病菌的菌属；通过对罗非鱼幼苗进行灭活疫苗免疫，采用ELISA用于测定该疫苗产生的抗体水平并测定各时期的血样指标，并对实验鱼进行攻毒实验以测定其免疫保护力的大小。经硫酸铵盐析、离子交换与SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定抗体。结果：本实验筛选出一株高致性病菌（编号为BC-2），确定该高致病菌为一种致罗非鱼死亡的蜡状芽孢杆菌，这是有关蜡状芽孢杆菌对罗非鱼有致病性的首次报道。从苏木素-尹红染色的组织切片中发现该菌株对罗非鱼的鳃与小肠组织结构变化的影响较大，但对于肌肉组织与肝组织的变化并不明显。对健康鱼的感染试验及定性数据机率分析，得到其对数半致死浓度（LD50）为7.5348、感染浓度为：3.4×107cfu/ml、置信限为95%；28天后对免疫鱼进行攻毒实验发现该疫苗的免疫保护力高达86.7%；每周的各项血液指标表明，吞噬指数、SOD、溶菌酶及免疫球蛋白IgM的含量与免疫保护力成正相关，吞噬指数、SOD、溶菌酶、IgM分别提高到0.0121、39.38U/ml、1096U/ml、0.975μg/ml，这些指标可以用于间接评价疫苗及罗非鱼的健康状况；白蛋白与RPS呈负相关；总蛋白与总胆固醇受到免疫的影响，但变化不大。该受免疫鱼体血清中抗体分子量的大小：重链为82kD，轻链为28kD。本课题研究为进一步研究蜡状芽孢菌的致病机理及疫苗的免疫效果测定等相关研究提供实验依据。