4型禽腺病毒野毒株的分离鉴定及其致病性研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:hbh0429
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心包积水-肝炎综合征(Hydropericardium-hepatitis syndrome,HHS)是由4型禽腺病毒(Type 4 fowl adenovirus,FAdV4)引起的禽类的一种急性传染病,其病理特征为心包积水和包涵体肝炎。自从2015年7月以来我国各省相继有HHS疾病爆发报道,且以肉鸡发病更为严重,给养禽业带来巨大的经济损失。本研究主要通过将病料匀浆接种SPF鸡胚盲传培养后将鸡胚毒接种于LMH细胞等方法分离鉴定病毒,对病毒Hexon基因克隆测序并进行生物信息学分析和动物回归试验等,来阐明FAdV-4GX01分离株的致病性和分子生物学特征。研宄结果显示:(1)通过PCR和Hexon基因生物学信息分析表明此FAdV-4GX01分离株属于4型禽腺病毒。(2)FAdV-4GX01株可以侵染LMH细胞且对其造成与参考毒株FAdV-4ON1株相同的细胞病变,电镜细胞核内观察到典型的禽腺病毒粒子。(3)该FAdV-4GX01株通过动物回归试验可复制出HHS疾病模型显心,产生较参考毒株FAdV-4ON1株接种鸡较严重的临床症状和病理变化。SPF鸡在接毒后3日开始出现嗜睡、呆立等症状,在第5-7日症状表现最严重,第14日时病情开始恢复。SPF鸡在接毒后第5-7日眼观剖解病变最严重,出现黄绿色包积水以及下可以在LMH肝脏出现肿胀、黄染、质脆并伴有条带状出血带,并且肝细胞核内出现明A嗜碱性包涵体。抗体检测表明感染鸡在接毒第5日后血清抗体水平出现显著上升趋势。(4)间接免疫荧光显示病毒抗原主要分布在肝脏和心脏;实时荧光定量PCR结果显示病毒含量最多的接毒日龄也为第5日,且鸡体内主要载验毒组织为肝脏和心脏。总之,本文分离鉴定的FdV-4GX01分离株为4型禽腺病毒,病毒主要靶器官为肝脏和心脏,其可引起典型HHS临床症状和病理变化,属于4型禽腺病毒流行毒株。
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