【摘 要】
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急性肺损伤（ALI）是动物饲养过程中严重的呼吸道疾病,严重威胁着畜禽的生命安全。越来越多的研究表明ALI的发生发展过程与炎症和氧化应激反应密不可分。因此,减轻炎症和氧化应激反应对于改善ALI具有重要意义。紫檀芪是一种具有生物活性的纯天然物质,多存在于常见的蓝莓、葡萄等植物中,有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗真菌等药理活性,同时越来越多的研究表明紫檀芪能够显著改善多种组织器官的损伤。本论文以紫檀芪为研究对
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31772721）；
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急性肺损伤（ALI）是动物饲养过程中严重的呼吸道疾病,严重威胁着畜禽的生命安全。越来越多的研究表明ALI的发生发展过程与炎症和氧化应激反应密不可分。因此,减轻炎症和氧化应激反应对于改善ALI具有重要意义。紫檀芪是一种具有生物活性的纯天然物质,多存在于常见的蓝莓、葡萄等植物中,有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗真菌等药理活性,同时越来越多的研究表明紫檀芪能够显著改善多种组织器官的损伤。本论文以紫檀芪为研究对象,建立LPS诱导的ALI小鼠模型,初步研究紫檀芪对其保护作用及其潜在机制。而后应用紫檀芪防治ALI雏鸡,观察紫檀芪对雏鸡的保护效果。首先,构建LPS诱导的ALI小鼠模型,分别用10、20和40 mg/kg紫檀芪对该模型进行预处理。其次,检测小鼠肺脏湿干重比值（W/D）的变化,并对其HE染色进行病理组织学观察;对支气管肺泡灌洗液（BALF）中总细胞、中性粒细胞、巨噬细胞进行计数,以及测定总蛋白浓度;测定肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性;然后,测定肺组织抗氧化应激指标超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,以及氧化应激指标丙二醛（MDA）含量;qRT-PCR测定肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA表达变化;最后,Western blotting检测NF-κB信号转导通路中p-IκB和p-p65蛋白以及Nrf2/HO-1信号转导通路中Nrf2和HO-1蛋白水平。结果显示,LPS诱导的ALI小鼠模型构建成功;紫檀芪降低了ALI小鼠肺脏的W/D值,改善了肺组织损伤程度,如维持肺组织结构完整性、减轻肺间质水肿和肺泡壁增厚、减少浸润性炎性细胞等;减少BALF中总细胞、中性粒细胞、巨噬细胞数目,以及总蛋白浓度;降低肺组织MPO活性;提高肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性,并降低MDA含量;降低肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA的表达;降低肺组织中p-IκB和p-p65蛋白水平,升高肺组织中Nrf2和HO-1蛋白水平。提示紫檀芪对ALI的保护作用机制主要是通过抑制NF-κB和激活Nrf2/HO-1信号转导通路,即抑制炎症反应和氧化应激反应。结果证实紫檀芪对LPS诱导的ALI小鼠模型具有保护作用,可作为治疗或保护LPS诱导的ALI雏鸡的候选药物。构建LPS诱导的ALI雏鸡模型,分别饲喂50、100和200 mg/kg紫檀芪对该模型进行处理。每日对雏鸡进行称重,并观察其采食量以及精神和体征状态;眼观肺脏形状、颜色、充血和坏死情况等组织病理学变化;检测雏鸡肺脏W/D的变化,并对其HE染色进行病理组织学观察;测定肺组织MPO活性;测定肺组织抗氧化应激指标SOD、CAT、GSH-Px活性,以及氧化应激指标MDA含量;qRT-PCR测定肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA表达变化。结果显示,LPS诱导的ALI雏鸡模型构建成功,但其每日采食量以及精神和体征状态并无明显异常;紫檀芪提升了ALI雏鸡的体重日增长率;雏鸡肺组织随着紫檀芪剂量的增加,形状和颜色逐渐趋于正常,充血和坏死情况有所改善;降低了ALI雏鸡肺脏的W/D值,改善了肺组织损伤程度,如维持肺组织结构完整性、减轻肺间质水肿和肺泡壁增厚、减少浸润性炎性细胞等;降低肺组织MPO活性;提高肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性,并降低MDA含量;降低肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA的表达。结果证实紫檀芪对LPS诱导的ALI雏鸡模型具有保护作用。综上所述,本论文证实紫檀芪对LPS诱导的ALI小鼠模型发挥保护作用,并初步揭示其作用机制是通过抑制炎症和氧化应激反应来实现的,而应用紫檀芪防治雏鸡ALI也证实了良好的保护效果。以上结果不仅为生产实践中有效防治ALI提供借鉴和参考,而且也可为雏鸡功能性饲料添加剂的研发提供实验依据。
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