【摘 要】
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本文研究了脂肪酶和纤维素酶的共固定化初探。通过脂肪酶的单酶活性和纤维素酶对脂肪酶活力的影响研究,选择对纤维素酶和脂肪酶合适的载体生物炭进行固定,对共固定技术进行探讨
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本文研究了脂肪酶和纤维素酶的共固定化初探。通过脂肪酶的单酶活性和纤维素酶对脂肪酶活力的影响研究,选择对纤维素酶和脂肪酶合适的载体生物炭进行固定,对共固定技术进行探讨,并对共固定化酶的应用进行初探。 以生物碳、明胶和活性炭为载体分别对脂肪酶固定,以酶活力作为载体筛选指标,优化其固定化条件,并考察所制备的固定化酶的稳定性等性质。结果表明,生物炭为载体制备的固定化酶具有较高的活性和稳定性。 研究了纤维素酶对脂肪酶的活力影响,发现纤维素酶对脂肪酶的活力有提高作用。在最佳条件下脂肪酶通过处理活力提高。通过纤维素酶处理后的脂肪酶的最适pH值与未处理的相同,但适应范围变宽。 选择纤维素酶与脂肪酶进行共固定。通过研究共固定方法,将脂肪酶和纤维素酶共固定在载体生物炭上,得到共固定化酶。在共固定化条件下进行优化并考察共固定化纤维素酶的酶学性质的影响。固定后的纤维素酶对酸碱的适应范围变宽,最适作用pH值没有改变。 选择共固定化酶在鼠李糖脂构造的反胶束系统中对油酸的酯化反应进行初探。通过正交实验得出共固化酶的最适pH=6,相比固定化单酶具有更宽的酸碱应用条件;最佳临界胶束浓度(CMC)为60与固定化单酶一样,但反应速率高于固定化单酶;最适温度45℃,相比固定化单酶具有更宽的温度应用条件的结论,反应最佳时间为2h,并考察了动力学米氏常数Km=26.6,Vmax=50 mmol·L1·min1·mg1。
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