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取水曲柳成熟种子的胚轴作为外植体,对其组织培养进行了系统的研究,获得了不定芽增生和植株再生。 初步试验结果显示:对于不定芽的诱导,TDZ比BA更为有效。以MS作为基本培养基添加1~2mg/L的TDZ进行初代培养,2周后不定芽增生达到最大值。继代培养后极小部分的不定芽伸长,转移到生根培养基后可诱导生根成为完整植株。然而存在着两大问题:1)外植体大量死亡;2)不定芽难以伸长。 由此,在初步实验结果的基础上,我们对不定芽死亡率高和不定芽难伸长的问题进行了进一步的研究,寻求解决途径。结果表明,高盐浓度的MS培养基对不定芽的诱导有促进作用,但不定芽死亡率高;低盐浓度的WPM培养基尽管对不定芽诱导没有优势,但可维持再生不定芽的正常生长。TDZ与BA配合使用对不定芽诱导的促进效果,比单独使用其中的任何一种激素的效果都要大。而且,这两种细胞分裂素的配合使用,对降低外植体的死亡率有很大的作用。最佳的诱导培养基为MS+2mg/L TDZ+0.01mg/LBA,诱导率可达83.3%。WPM,以其低盐浓度、“温和”的特性,被用于进行不定芽的继代培养。BA与IBA配合使用,对不定芽的伸长生长有很好的促进效果。最佳的配比为2mg/L BA+0.01mg/L IBA。 综合研究结果,我们认为,培养基、细胞分裂素和生长素的“协同作用”对水曲柳胚轴外植体的不定芽诱导以及再生不定芽的伸长生长起着至关重要的作用,尤其是激素之间的平衡互作是一个很重要的影响因素。