生物活性肽容易受到胃肠道蛋白酶和肽酶的降解,不能顺利到达靶组织发挥作用。本研究通过纳米包埋技术提高燕麦多肽在胃肠道中的稳定性,抑制燕麦多肽在胃肠道中的二次水解。具体结果如下:1.提取燕麦球蛋白组分,胰蛋白酶水解14 h和碱性蛋白酶水解2 h后的水解产物对DPP4均有良好的抑制作用,且具有浓度依赖型关系。利用碱性蛋白酶进行水解时能在较短时间内释放出更多的DPP4抑制肽,但切割位点不易控制,因此选择胰蛋白酶对燕麦球蛋白进行水解。2.对胰蛋白酶水解14 h后的水解产物进行电泳实验和水解度的测定。水解产物的分子量均在14 kDa以下,水解度为19.25%。对水解产物进行超滤,得到分子量小于3 kDa(Mw<3 kDa)的组分OGL和分子量在3 kDa-10 kDa之间的组分OGH(3 kDa<Mw<10 kDa)。研究了两种不同分子量的燕麦多肽对DPP4的抑制作用,发现OGL对DPP4的抑制作用较强,IC50值为0.12 mg/mL,OGH的IC50值为2.42 mg/mL。OGL和OGH的疏水性分别为40和79。3.利用固体脂质纳米颗粒(SLN)对两部分燕麦多肽进行包埋,并研究包埋后的固体脂质纳米颗粒的特征。纳米颗粒的粒径均在100 nm-280 nm之间,Zeta电位的绝对值在19 mV-25 mV之间,多分散指数(PDI)值在0.160-0.444之间。OGL-SLN和OGH-SLN的包埋率分别为75.6%和69.8%。其次,对包埋后的纳米颗粒(OGB-SLN)进行储藏稳定性研究,表明OGB-SLN可以在4℃环境下稳定储藏30d。同时OGB-SLN在不同pH值、不同紫外照射时间、不同处理温度条件下都具有良好的稳定性。4.对包埋后的两部分燕麦多肽纳米颗粒进行体外释放实验。包埋后的OGB-SLN在胃液中的释放率小于7.87%,表明OGB-SLN能在酸性环境中保持稳定并且可以有效地保护多肽免于泄漏。经过肠液后,部分多肽得到了释放,最高达到42.0%;通过胃肠液6 h后,未经包埋的多肽(OGB)对DPP4的抑制率几乎为0,而OGB-SLN对DPP4的抑制率最高为48.3%,最低为26.0%;通过胃肠液后6 h,OGB的水解度最高为3.6%,OGB-SLN的水解度最高为0.86%。进一步反映出SLN对DPP4抑制肽的保护作用。5.OGL-SLN和OGH-SLN通过胃肠液6 h后,释放率分别为33.0%和42.0%;对DPP4的抑制率分别为48.3和26.0%;水解度分别为0.86%和0.6%,通过这三部分结果可以看出SLN对OGH的包埋效果优于OGL。6.傅立叶变换红外光谱(FTIR)、热重分析(TGA)和X射线衍射(XRD)对肽、空脂质体和肽-脂质体进行分析。FTIR显示OGL和OGH与SLN极性和疏水区域具有不同的结合能力,TGA显示包埋后肽的热稳定性得到显著提高(p<0.05),XRD分析显示OGL具有较高的结晶度,这可以解释OGL在胃肠液中的高稳定性。本研究的结果表明,SLN可以提高OGB在模拟胃肠液中的稳定性,增强燕麦多肽对DPP4的抑制作用,值得深入研究。