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蝴蝶兰(Phalaenopsis)是一种广泛栽培的观赏花卉,因其品种繁多、花期长、颜色丰富,深受人们的喜爱,具有较高的观赏价值及经济价值。蝴蝶兰从定植到开花大约需要18-24个月的时间,生产周期长,上市销售时间较为集中,如何缩短其生长周期及实现周年供应是蝴蝶兰生产所面临的一个关键问题。FT(FLOWER LOCUS T)和 MFT(MOTHER OF FT AND TFL1)基因同属于 PEBP家族,是促进植物从营养生长到生殖生长的转变的一个关键基因,多数FT同源基因在不同植物中表达显示其具有促进提早开花的作用。对蝴蝶兰FT同源基因的表达特征及功能研究将为利用基因工程技术改良蝴蝶兰开花特征提供理论基础。本研究以蝴蝶兰栽培品种为材料,克隆了 3个PEBP家族基因,对其进行了异源表达及功能分析,并研究了环境信号对蝴蝶兰FT和MF7T基因表达的影响。主要研究结果如下:1.从小兰屿蝴蝶兰数据库中BLAST出8个PEBP家族相关基因,根据8个基因的CDs序列全长设计扩增引物。以蝴蝶兰栽培品种’冰淇淋,为材料,克隆出了 3个分别与小兰屿蝴蝶兰PEQU15502、PEQU33463、PEQU06435高度一致的基因,其开放阅读框(ORF)分别为519bp、528bp、525bp。经过氨基酸序列比对和系统进化树分析,PEQU15502、EQU33463属于FT-Like 基因,PEQU06435属于 MFT-Like基因,将所克隆的基因分别命名为PPhFT5、PhFT6、PhMFT。2.将3个基因分别构建过表达载体pCAMBIA1302-PPhFT5、pCAMBIA1302-PhFT6及pCAMBIA1302-PhMFT,利用农杆菌介导法将重组载体转化拟南芥,通过潮霉素抗性筛选及PCR鉴定,获得转化的拟南芥株系。通过对T2代拟南芥株系进行表型观察和分析,结果显示PPhFT5和PhMFT在拟南芥中异源过表达具有促进提早开花的作用,基因的表达越强,其促进开花的效应越明显,而PhFT6基因具有延迟开花的效应。3.对转基因拟南芥进行低温和短日照处理,研究了转F7、MFT基因的拟南芥植株对不同外界环境的响应,结果表明低温处理较大程度地延迟拟南芥开花,短日照处理减弱了各个转基因株系和野生型之间开花时间的差异。对转基因拟南芥中开花通路相关的内源基因CO、FT、T、FD、SOC1、LFY、AP1等的表达特征进行半定量分析表明,3种转基因拟南芥叶片中的FT、SOC1基因相比于野生型表达上调,拟南芥花序中,LFY和AP1在转PhFT5、PhMFT的拟南芥中上调,在转PhFT6的拟南芥中表达下调。