化痰开窍电针对高血脂合并脑缺血大鼠神经干细胞的影响

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:shashh
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目的:建立高血脂合并脑缺血大鼠病理模型,探讨“化痰开窍”电针配伍对其血脂、行为学、脑组织形态学及皮层、侧脑室室管膜下区增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响及作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、高血脂合并假手术组、高脂血症合并脑缺血模型组、高脂血症合并脑缺血电针1组和2组。除正常组外,其余各组大鼠喂养高脂饲料6周,第43天开始电针1组电针大鼠双侧“丰隆”,每日1次,治疗7天。第50天模型组、电针1组、2组大鼠采用50%FeCl3化学诱导大脑中动脉血栓闭塞,造成高脂血症合并脑缺血模型。电针1、2组电针“百会”、“丰隆”穴,每日1次,分1、7、14天后处死。用生物化学法检测血脂,用神经功能评分法评价行学变化,用2,3,5-氯化三苯基四氮挫(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)法检测脑梗死体积,进行苏木素—伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色,用光镜研究病理形态,用免疫组化法检测PCNA阳性表达。结果:(1)血脂四项:大鼠喂养高脂饲料7周,建立脑血栓模型术后1、7、14天,甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)经球形度检验,时间点上有显著差异(P<0.01);与正常组比较,模型组大鼠总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、LDL 升高(P<0.05,P<0.01),高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)降低(P<0.05,P<0.01),高血脂模型造模成功。针刺治疗后,术后7天,与模型组比较,TC、LDL、TG电针1,2组显著降低(P<0.01)。HDL电针1、2组均有升高。术后14天,TC、TG、LDL电针1,2组均降低,HDL电针1、2组均升高。(2)神经行为学:模型组大鼠在术后24h出现前肢屈曲、患侧后肢无力、原地转圈等症状,神经功能缺损评分较高;电针1,2组大鼠神经功能缺损症状明显轻于模型组,有显著统计学差异(P<0.01),与电针2组相比,电针1组大鼠神经功能缺损症状有减轻趋势。(3)脑梗死体积:电针1,2组大鼠的脑梗死体积与模型组相比,显著缩小,且具有显著统计学差异(P<0.01)。(4)脑组织形态:假手术组皮层神经细胞、胶质细胞排列清楚,结构完整,核仁清晰,胞浆无红染。脑缺血造模1天后,缺血灶出现在左侧额叶,术后模型组可见神经元周围间隙扩大、细胞排列散乱,部分血管周围有红细胞渗出,并有炎性细胞浸润:缺血7天后,坏死细胞明显增多,胞核深染,核周出现空泡,部分细胞核固缩,偶见深染的凋亡小体。缺血14天,坏死面积增大,大面积细胞坏死,神经细胞及血管周围间隙扩大,间质组织水肿明显。针刺治疗后,脑缺血治疗组缺血区周围胶质水肿减轻,细胞核逐渐恢复正常。(5)免疫组化结果显示:与假手术组相比,模型组PCNA阳性表达增强,阳性细胞数明显增多(P<0.05)。与模型组相比,电针1、2组中的PCNA阳性表达明显增强,阳性细胞数增多,有明显统计学差异(P<0.05)。与治疗2组相比,治疗1组有升高趋势。除假手术组外,各组PCNA阳性表达均在术后1天开始逐渐增长,术后7天达到峰值,14天后逐渐下降。结果提示:与模型组相比,治疗1,2组促进神经干细胞增殖的作用更加明显;与治疗2组相比,在术前进行预治疗,可以起到更好的治疗作用。结论:“化痰开窍”针刺配穴可降低血脂,改善大鼠神经功能缺损状态,缩小梗死灶大小,促进神经细胞的再生、增殖,改善脑组织病理形态,针刺7天时效果最为显著;且在前期针对高血脂进行预针刺治疗可以起到更好的治疗效果,为临床针灸治疗中风提供理论依据。
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