论文部分内容阅读
目的：本实验探讨贝伐单抗(Bevacizumab)是否对兔去上皮瓣准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术(Off-flap epipolis laser in situkeratomileusis, Off-flap Epi-LASIK)术后角膜术区转化生长因子-β1(Transforming grown facter-β1, TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达产生影响,是否对角膜上皮下混浊(Haze)形成产生影响。方法：健康的成年普通级青紫兰兔26只,雌雄兼用,体重2.5～3.0kg,分成4组,随机选取其中2只作为空白对照组,其余24只兔均行Off-flap Epi-LASIK手术,术后随机分为三组,每组8只(16眼),术后即给予结膜下注射Bevacizumab2.5mg (0.1mL)为治疗组,分别于术后和术后4天给予两次结膜下注射Bevacizumab2.5mg (0.1mL)治疗的为加强组,于术后给予0.1ml生理盐水处理为对照组；术后裂隙灯显微镜观察角膜haze程度并记录,分别于1周、4周时取兔眼角膜,部分行HE染色和PAS染色观察组织病理变化,另一部分用于免疫组织化学研究,检测TGF-β1、 α-SMA在角膜组织中的表达。结果：1、行Off-flap Epi-LASIK手术后,三组角膜上皮均于术后4～5d完全愈合,经统计学分析差异无显著性(P>0.05)；2、术后1周后,对照组Haze最明显,均值为1.25,均比经Bevacizumab(?)台疗的治疗组(均值0.75)和加强组(均值0.66) Haze均值高,经统计学分析比较差异均有显著意义(P<0.01),但治疗组和加强组Haze均值比较无显著差异(P>0.05)；术后4周结果相似；3、术后1周,对照组中央角膜上皮细胞增生,浅基质层成纤维细胞数量多,呈活跃增殖状态,纤维排列紊乱,炎症细胞游走；治疗组和加强组角膜中央上皮细胞较规则,浅基质层见一定量成纤维细胞,纤维排列较整齐；术后4周,治疗组和加强组组织结构趋于正常,而对照组中央角膜上皮细胞增生明显,基底细胞大小不一,未见明显柱状结构,浅基质层成纤维细胞数量明显增多,功能活跃,胶原纤维增生、排列紊乱明显,纤维间隙较大,明显多于治疗组和加强组。4、术后1、4周,对照组术区角膜基质层TGF-β1、α-SMA的表达均较治疗组和加强组高(P<0.01)；治疗组术区角膜基质层TGF-β1、α-SMA的表达较加强组高(P<0.01)；5、对照组基底膜在术后1周和4周均未见完整、连续；术后1周,治疗组和加强组见基底膜基本完整和连续,术后4周,两组基底膜均更清晰,更完整、更连续,与正常对照组相同。结论：1、Off-flap Epi-LASIK术后早期角膜基质内成纤维细胞活化增殖,新生胶原纤维排列紊乱,角膜Haze形成；2、Bevacizumab对Off-flap Epi-LASIK术后角膜上皮早期愈合没有明显抑制作用；3. Bevacizumab能减少Off-flap Epi-LASIK术后兔眼早期角膜TGF-β1和α-SMA表达水平,从而抑制角膜Haze形成；4.Bevacizumab能促进上皮细胞基底层恢复,形成一个天然的物理屏障,抑制成纤维细胞增殖、转化,降低纤维化反应,从而减少角膜Haze生成,保持角膜透明性。5.Bevacizumab减少Off-flap Epi-LASIK术后兔眼早期角膜基质层TGF-β1和α-SMA表达水平,抑制角膜Haze形成机制再探讨。鉴于Bevacizumab安全性和有效性的考虑,有望成为预防和早期治疗角膜表面屈光手术术后角膜Haze的理想药物。