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沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)属于红螺菌科、红假单胞菌属,是目前研究和应用最广泛的一种光合细菌,是我国农业部允许使用的饲料级微生物之一,其制剂已被广泛应用于水产养殖、饲料添加剂、污水处理等多个领域,并取得巨大的经济、生态和社会效益。微生物制剂需求量大,但由于市场混乱、监管不力,目前产品存在价格高、有效活菌数低、产品稳定性差、保质期短等问题。本研究研究的目的是利用价格低廉的农副产品作为培养基,通过发酵工艺优化及保藏条件优化,旨在降低生产成本,提高活菌数,促进沼泽红假单胞菌推广普及使用。本研究首先在500mL摇瓶下进行,从多种价格低廉的农副产品筛选以作为沼泽红假单胞菌培养基的主要原料,通过单因素试验结果确定最佳碳源为糖蜜,最佳氮源为花生粕。通过正交试验对碳源、氮源、无机盐的用量优化,确定最佳培养基配方为:糖蜜9g/L、花生粕5g/L、KH2PO4 1.0g/L、Na2HPO4 1.0g/L、MgCl2 2.0g/L、NaCl 2.0g/L、CaCl20.2g/L、FeCl3 0.02g/L、酵母浸粉0.5g/L。发酵培养基配方确定后,对摇瓶发酵条件优化,确定最佳培养条件为:pH值6.8、接种量6%、温度37℃、转速100r/min。摇瓶试验优化后,发酵培养48h,发酵液活菌浓度可达3.96×109cfu/mL。参考摇瓶试验结果,对沼泽红假单胞菌在5L发酵罐上的发酵工艺进一步研究,通过方差分析及多重比较确定最佳发酵工艺为恒定pH值6.8、搅拌速度300r/min、通气量2L/min、中和剂组合为乙酸+碳酸钠,发酵培养36h,活菌数高达6.43×109cfu/mL,大幅高于摇瓶试验的3.96×109cfu/mL,并可缩短培养时间12h。沼泽红假单胞菌液态制剂保藏试验主要研究菌体离心收集工艺条件和研究不同pH值、不同浓度甘油对液态制剂保藏效果的影响。经过6种不同离心工艺比较,发酵液在8000r/min、10min菌体离心效果最好,收得率81.5%。在保藏试验中,pH值5.06.0环境下甘油用量0%1%,在常温下保藏效果最好,经过15周的保藏存活率在6%左右,活菌浓度为1.211.42×108cfu/mL。