珍珠菜属4种园林植物的种质特性及创新研究

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珍珠菜属(Lysimachia L.)植物在全世界约有191种,中国特有种约120种。目前,该属植物已有50多种开发为药用或园林植物。据初步统计,全球有30多个栽培品种用作观赏,而在国内,珍珠菜属的观赏物种及品种却相当有限。因此,选育优良的珍珠菜属乡土园林植物新品种前景十分广阔。本研究对近年来从华中地区收集的珍珠菜属优良植株,如过路黄L.christinae(ES,W1,W2,W3,HS,BD和HL)、聚花过路黄L.congestiflora(临时救:ZY、ZJ和JH)、紫脉过路黄L.rubinervis(ZM)和疏头过路黄L.pseudohenryi(ST),从种质资源的鉴定、评价及创新方面进行了研究,为园林绿化提供了珍珠菜属园林植物新品种。主要结果如下:1.从植株形态、染色体数目及核型、核糖体DNA的ITS序列方面对种质资源进行了鉴定。形态研究表明:4种12个类型植株的颜色变化明显,除HL,HS和ST茎叶均为绿色、花瓣为黄色外,ES,W1,W2,W3,BD,JH,ZJ和ZM均有不同程度的彩色叶脉或花瓣基部,ZY叶脉为黄绿色,脉间部分为紫褐色,花瓣为黄色。核型分析表明:过路黄的核型为2n=24=2m+2sm+4st+16t;聚花过路黄的核型为2n=24=2m+4sm+4st+14t;紫脉过路黄的核型2n=24=4m+4sm+4st+12t。在分子水平上,ITS序列(Genebank序列号为FJ529510-FJ529522)支持形态学分类结果,四个种分别聚为一枝,种内各类型之间的亲缘关系较近,过路黄7个类型的ITS序列一致性为96.14%。鉴定表明:ES,W1,W2,W3,HS,BD和HL均为过路黄的地理变异类型;ZJ和JH为聚花过路黄的地理变异类型,而ZY可能为聚花过路黄的野生突变类型。2.从生物学特性、观赏特性和园林应用特性方面对各园林植物种质资源进行了评价。生物学特性研究表明:过路黄、聚花过路黄和紫脉过路黄均为长日照植物,光周期和光照强度对各植株的生长发育和开花均有影响,长日照可使植株提前开花,花量增加。在观赏特性方面:ES,W1,W2,W3,ZJ,ZY和ZM的茎叶紫红色性状明显、稳定,5月开花,花期约30天,花量大,黄色,花瓣基部有不同程度的红色,观赏价值极高,是十分有应用前景的彩叶植物。在ES,W1,W2,W3,ZJ,ZY和ZM的园林应用特性方面:各植株对光照强度的适应性强;耐热性和耐旱性均强于市场上应用最广泛的欧洲品种Lysimachia nummularia‘Aurea’(JY);耐寒性方面,W1,W3>W2>ES,ZJ,ZY ZM,JY>BD;耐踩踏性强于白车轴草(Trifolium repens)和红花酢浆草(Oxalis rubra);分株、扦插和茎段撒播均可繁殖,且铺展能力强,适合作园林地被植物或盆栽;有较强的耐涝性,没有入侵性,无明显病虫害。因此,以上彩叶植株在华中地区及相似气候地区的园林应用潜力极大。对种质资源进行鉴定和评价之后,根据《国际栽培植物命名法规》第七版,ES,W1,W2和W3被拟定为4个新品种,即Lysimachia christinae‘Zixin’(‘紫心’过路黄)、Lysimachia christinae‘Zixin W1’(‘紫心W1’过路黄)、Lysimachia christinae‘ZixinW2’(‘紫心W2’过路黄)、Lysimachia christinae‘Zixin W3’(‘紫心W3’过路黄);ZY和ZJ被拟定为新品种Lysimachia congestiflora‘Zidie’(‘紫蝶’聚花过路黄)和Lysimachiacongestiflora‘Zimai’(‘紫脉’聚花过路黄)。同时,对拟定的过路黄品种进行了品种分类。3.从辐射诱变、多倍体诱导和遗传转化方面对部分植株进行了种质资源创新的初步研究。60Co-γ辐射实验表明:茎尖和离体再生芽经核辐射后离体培养的方法适合用来做过路黄的辐射诱变。本研究从离体再生芽ES的再生植株中获得了一株过路黄优良变异植株EF,该变异类型彩脉面积比ES增加了21.5%。多倍体诱导实验表明:秋水仙素浸泡离体茎尖适合过路黄多倍体植株的诱导,浸泡12h最有利于多倍体植株的获得,秋水仙素的适宜浓度为0.05-0.1%。本研究初步获得了ES的多倍体植物,多倍体植株的气孔比2倍体植株的气孔长度增加38.46%,宽度增加53.33%。通过离体培养,建立了完整高效的过路黄、紫脉过路黄、聚花过路黄和L.nummularia的离体快繁及植株再生体系。结果显示:培养基MS+3.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA最适合过路黄叶片及茎尖的植株再生培养,诱导率均为100%,增殖倍数较高,其中ES高达14.34;茎尖是紫脉过路黄植株再生培养最合适的外植体,最适合的培养基配方是MS+(3.0-5.0)mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,诱导率为100%,增殖倍数为16.87-17.20;叶片是L.nummularia植株再生培养最适合的外植体,最适合的培养基配方是MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,诱导率为100%,增殖倍数为12.73;聚花过路黄带节茎段在培养基MS+(3.0-5.0)mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA中的丛生芽诱导率为100%,叶片则不适合作植株再生培养的外植体。各植株在培养基1/2MS+0.1mg/LNAA中的生根数量显著高于各植株在其它培养基中的生根数量。各植株的生根植株移栽成活率均大于95%,移栽后,植株生长势旺盛,整齐一致。在ES的叶片遗传转化体系筛选中,250mg/L的Cef可以抑制选择培养中农杆菌的生长,50mg/L的Km适合进行抗性植株的筛选。
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