背景与目的:心肌肥大是多种心血管疾病的共同病理过程,是导致心原性死亡的最重要的病理基础之一。近年来,神经体液因素尤其是肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）失调所造成的心肌肥大越来越受到重视。现已发现,醛固酮是心肌肥大的重要诱导因素。研究表明,CaN依赖的信号通路可能在心肌肥大的发生发展中起重要作用。目前在心肌肥大的发生机制的研究上,有人应用RNAi技术在培养的心肌细胞上研究有关肥大的相关基因,但目前尚无直接针对CaN进行RNAi的研究。我们认为针对CaN致心肌肥大的瓶颈作用,通过RNAi技术,进行深入研究具有重要意义。本课题在培养的原代大鼠心肌细胞上,在醛固酮等引起心肌细胞肥大的刺激因素作用下,同时应用CaN的特异性抑制剂—环孢霉素A（cyclosporin A, CsA）及醛固酮受体拮抗剂螺内酯,通过测定细胞大小、肥大相关基因ANF及β-MHC表达、CaN基因表达及蛋白表达水平,进一步观察CaN在醛固酮刺激引起的心肌细胞肥大中的重要作用。应用siRNA特异性引起CaN AβmRNA的基因表达沉默,通过测定CaN mRNA及其蛋白表达水平观察所选择的siRNA片段所引起的RNAi的效果,从而更能明确CaN AβmRNA的功能片段所在位置。 方法:取1-3d龄Wistar乳鼠心肌细胞进行培养。实验分组:醛固酮组:每孔加入醛固酮10^-9mol/L;空白对照组:不加任何处理因素,与加入处理因素的组别共同进行换液处理;靶标siRNA组:每孔除加入醛固酮10^-9mol/L外,另外予以细胞2μl/孔针对CaN Aβ mRNA的能在细胞内表达siRNA的DNA表达盒进行转染;靶标siRNA阴性对照