论文部分内容阅读
辅助肝移植在理论上有许多优点,比如手术创伤较原位肝移植小,受者并不完全依赖于供肝,在认为情况合适时可以摘除供肝而避免长期应用免疫抑制剂等。但其临床效果并不理想。失败的主要原因有排斥反应、肝静脉回流障碍及门静脉血供不足等。 随着分子生物学突飞猛进的发展,人们对分子遗传学、细胞的正常功能以及疾病的发病机理有了更深入的了解。更进一步的发展将是基因治疗。基因治疗中基因转移的程序分为间接体内基因治疗和直接体内基因治疗,目前应用于临床前期和临床研究的基因转移主要是间接体内途径,但有其局限性。需要发展直接体内基因转移。 将外源基因转移至移植肝脏肝细胞具有改变肝细胞免疫原性的可能,从而使受体对供肝产生耐受,减轻甚至消除免疫排斥反应。目前最为有效的基因转移系统是经病毒介导的基因转移,而复制缺陷型反转录病毒能稳定地整合在许多类型细胞的基因组中,并适当表达而不影响宿主细胞的功能。本研究的主要目的是建立大鼠辅助部分移植肝的反转录病毒介导的直接体内基因转移方法,并评估此方法的可行性和可靠性,为以后更深入的研究奠定基础。 本研究的第一部分首先建立和改良了大鼠辅助部分肝移植的模型,移植肝占供肝的30%,植于受体的右肝下间隙。将移植肝下腔静脉出口端修剪成斜形,使两下腔静脉吻合后的回流方向呈锐角。研究证明,使用此方法可以明显减小静脉回流压力而避免供肝瘀血。门静脉吻合采用袖套法吻合,缩短了门静脉阻断时间。移植肝胆管支架管插入十二指肠并用荷包缝合固定。结果表明1周生存率为88%,2周生存率达80%。认为此改良的动物模型可用于肝再生、排斥反应以及基因转移的研究。 本研究的第二部分为反转录病毒介导的直接体内基因转移在此肝移植模型的应用研究。在辅助部分肝移植术后24小时,阻断供肝门静脉并灌注含反转录病毒(BAG)的上清液,灌注的速度为1.0