猫细小病毒间接ELISA方法的建立及灭活疫苗毒株筛选

被引量 : 0次 | 上传用户:qishanf
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猫泛白细胞减少症是由猫细小病毒(FPV)引起的一种急性高度接触性致死性传染病。猫细小病毒在自然状态下能感染几乎所有的猫科、鼬科及浣熊科动物,引起猫、水貂、浣熊等动物很高的死亡率,其中尤其以幼小的猫科动物最为易感。该病对各种野生动物和特种经济动物构成严重的威胁,因此建立FPV的诊断方法和研制高效的灭活疫苗对防治该病具有重要的意义。本研究首先用辛酸-硫酸铵法和葡聚糖分子筛层析分离纯化猫IgG,通过免疫新西兰兔制得高效价的兔抗猫IgG;辛酸-硫酸铵法和亲和层析法纯化兔抗猫IgG,采用改良过碘酸钠法酶标,初步制备ELISA试验使用的酶标兔抗猫抗体。通过酶标抗体的活性测定、定量测定、稀释度测定明确了标记抗体的酶和抗体含量以及工作浓度等指标。接着通过对间接ELISA方法的包被、封闭、反应等一系列条件的优化确定,初步建立检测猫细小病毒抗体的间接ELISA方法,检测结果与血凝抑制试验比较,证明建立的方法科学合理。为免疫学实验提供了方法,同时为猫的实验动物标准化提供准确可行的检测方法。最后,对猫细小病毒灭活疫苗的毒株进行筛选。主要目的是从本实验室保存的两株猫细小病毒和本实验分离鉴定的两株猫细小病毒中筛选免疫原性良好的毒株作为灭活疫苗的毒株。通过F81细胞培养该四株候选毒株,经过差速离心、超速离心以及蔗糖梯度离心等办法纯化病毒。免疫动物,定期心脏采血,用前面实验建立的间接ELISA方法和血凝抑制试验测定猫细小病毒抗体水平,筛选出免疫原性良好的毒株作为猫细小病毒灭活疫苗毒株。此外,本研究还将对灭活剂、佐剂等进行筛选;测定幼猫母源抗体消长规律,制定免疫程序;进行疫苗保存期试验;最后通过保护试验和田间试验等来检验研制的灭活疫苗的保护效果。
其他文献
补语在汉语语法中所占的地位是举足轻重的,是汉语语法的一个重要组成部分,也是留学生在学习汉语时的一个难点。尤其是可能补语,对留学生来说,特别是对于日本留学生来说,更是
语言迁移在语言学和第二语言习得的研究中一直占有重要地位。本文从语言迁移的角度入手,分析不同层次的中国学生英语关系从句的学习,并尝试用语言迁移理论解释这些规律和特征
从漆画材料与工艺入手去分析现当代漆艺艺术,从漆性之美、漆色之美、漆材料之美到漆语言之美进行分析创作绘画中的材料追求与之相应的原始欣赏美学。漆画很早就在神州大地出
慢性脑缺血患者的病程较长,很多患者都具有终身患病的特点,无法在短期内得到有效的治疗.同时,慢性脑缺血在长期发病后,很容易导致患者出现痴呆.针对慢性脑缺血引起的痴呆患者
目的:探讨阿维A对银屑病患者血脂的影响及意义。方法:收集郑州大学第一附属医院皮肤科2013年1月—2015年10月确诊为银屑病的住院患者资料,进行回顾性分析,并使用SPSS 17.0软
2011年以来,江苏省东台市组织开展了声势浩大、前所未有、城乡全覆盖的河道沟塘环境综合整治,对整治后的河道沟塘全面建立长效管护体制机制。河道水环境发生翻天覆地的变化,一片
1921年党的"一大"至1923年党的"三大"期间,中国共产党的中心工作经历了由工人运动到国民革命的转变,这个转变从根本上说是由中国共产党的基本纲领的发展变化决定的。本文试从中国
<正>高等教育城乡规划专业评估委员会2015年5月23日在广州投票决定,9所学校的城乡规划专业通过了该委员会的评估,其中,新增6所学校(青岛理工大学、广东工业大学、四川大学、
在舆论形成研究中,社会心理学是重要的分析传统,也是将微观个体与宏观社会连接起来的理论之桥。通过梳理社会心理学为舆论形成研究提供理论工具和思想资源。基于社会心理学中
本课题针对国内现有同类仪器测量精度低,国外同类产品虽然精度高,但价格昂贵等实际问题,研制了基于远程数字通信的高精度井温-井深测量仪,解决了传统测量中深度坐标偏差较大