论文部分内容阅读
乙型肝炎其病原体是乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)。HBV是一小的DNA病毒，其复制过程需要经过RNA的生物合成阶段。HBV C基因表达的C蛋白(HBcAg、HBeAg)参与病毒核衣壳的装配，是免疫攻击的靶抗原，因此剪切C基因mRNA既可抑制HBV的复制，又可阻断HBcAg的表达。由于锤头型核酶具有分子小，可序列特异性地切割靶RNA的特点，所以可用它切割HBV C基因的RNA，阻断HBV基因的复制和表达。本研究设计多位点核酶观察其对靶RNA的切割作用。 利用计算机对HBV C基因的mRNA二级结构进行分析，设计并合成了5’顺式、3’顺式核酶及针对C基因RNA的三个锤头状核酶基因，三个核酶分别剪切C基因mRNA上的不同位点。将上述核酶基因构建成带有5’和3’顺式核酶的体外转录质粒中，其中包括单个、两个或三个串联的针对靶基因的核酶基因质粒。体外转录结果表明我们构