反硝化作用抑制硫酸盐还原菌活性的技术研究

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油田系统中由于硫化物造成设备腐蚀、滤料污染等危害日趋严重。资料表明,硫酸盐还原菌(SRB)是导致地面系统硫化物产生的根源。目前,大庆油田普遍采用杀灭SRB的办法来控制SRB造成的危害,主要有物理杀菌法和化学杀菌法,均取得了显著效果。近年来,生物抑制方法受到越来越多研究人员的重视。生物抑制方法指利用微生物之间的共生、竞争和拮抗关系抑制SRB。反硝化细菌(DNB)在生存习性上与SRB非常接近,当系统中含有一定量的硝酸盐时,会影响SRB还原硫酸盐,从而达到抑制SRB活性的目的。通过调研大庆油田现有资料,考察大庆油田地面系统中原生反硝化细菌的反硝化能力与SRB还原硫酸盐能力的相对水平,考察大庆油田不同油藏系统的微生物群落结构;通过室内试验模型,考察反硝化抑制硫酸盐还原过程中的最佳生态因子和微生物群落的动态演替规律,确定反硝化作用抑制硫酸盐还原作用的操作条件。应用Hungate厌氧技术,从常规水驱四厂杏九联采出液中分离到一株硫酸盐还原功能菌株A9,该菌株为G+,短杆状,能运动,具有硫酸盐还原功能,产H2S,严格厌氧;能以水溶性聚丙烯酰胺(HPAM)为唯一碳源;A9菌株与Anaerofilum pentosovorans(AP716816S)的相似性水平达98%,初步鉴定可能为Anaerofilum属的新种,暂时命名为Anaerofilum pentosovorans A9(GenBank登录号为DQ011252)。通过对大庆油田常规水驱采出液和含聚采出液的水质分析和构建16S rRNA克隆文库,PCR-RFLP分析与序列测定,常规水驱采出液中的细菌分别属于5个OUT主要的优势类群,主要分布在变形菌门δ、β、ε、γ-变形菌纲(8%、3%、32%、30%),梭菌纲(Clostridia)(12%),脱铁杆菌门脱铁杆菌纲(Deferribacteres)(3%);拟杆菌门拟杆菌纲(Bacteroidetes)(1%);酸杆菌门(Acidobacteria)酸杆菌纲(Acidobacteia)(3%)以及广古菌门甲烷杆菌纲(Methanobacteria)(4%)。其中变形菌门(Proteobacteria)占到总克隆数的73%;含聚合物采出液中的细菌分别属于7个OUT主要的优势类群,主要分布在以下三个菌门中,其中包括变形菌门(Proteobacteria)占总克隆数的71.43%,δ、β、ε、γ-变形菌纲(5.71%、8.57%、28.57%、28.57%);厚壁菌门(Firimicutes)梭菌属(Clostridia)(25.71%) ,脱铁杆菌门(Deferribacteres)、脱铁杆菌纲(Deferribacteres)(2.86%)。其中石油降解菌
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