干扰素-γ(IFN-γ)诱导的先天性免疫应答在抑制弓形虫感染中起着重要的作用。IFN-γ介导的小鼠体内弓形虫的清除需要免疫相关GTPases(IRGs)和鸟苷酸结合蛋白(GBPs)以及自噬蛋白等的参与。然而,在IFN-γ刺激的人类细胞中,这些效应器(如IRGs)不表达或功能不显著(如GBPs)。那么,这些人类细胞如何抑制弓形虫的生长?有报道称IFN-γ能够刺激HeLa细胞以非酸化依赖的方式抑制弓形虫的生长。另有研究发现泛素、自噬受体p62和NDP52以及LC3等均能够被招募至IFN-γ诱导的人细胞中弓形虫的PVs附近,并特异性抑制弓形虫的生长。也有研究表明,GABARAPL2而非LC3在IFN-γ诱导的小鼠清除弓形虫的过程中发挥重要功能。但是,人类细胞与小鼠细胞在IFN-γ刺激的抑制弓形虫感染的机制上存在差异。因此,验证HeLa细胞中GABARAPL2在抑制弓形虫感染中的作用至关重要。本研究首先采用CRISPR/Cas9技术获得了 GABARAPL2基因敲除的HeLa细胞系(GABARAPL2KO),并通过免疫荧光检测发现经IFN-γ诱导的HeLa细胞中GABARAPL2能够被募集至弓形虫PVs附近,并在抑制弓形虫生长的过程中发挥着关键作用;同时,我们还发现GABARAPL2并非直接结合于弓形虫PVs上,而是结合于PVs外的膜结构上。本研究在GABARAPL2KO细胞中利用转染重组质粒补回表达GABARAPL2或GABARAPL2(G116A)突变蛋白,经间接免疫荧光检测发现,在IFN-γ诱导的情况下,GABARAPL2(G116A)突变蛋白并未募集至弓形虫PVs附近,这表明GABARAPL2是通过脂化作用被募集至弓形虫PVs附近的。此外,本研究还通过间接免疫荧光检测发现GABARAPL2的正确定位和功能的发挥需要泛素及自噬受体p62、NDP52、OPTN以及自噬相关蛋白ATG5向弓形虫PVs的正确定位;而自噬受体p62、NDP52、OPTN及ATG5的缺失也严重影响IFN-γ对弓形虫的抑制作用。本研究进一步展示了一种非典型的细胞自噬途径,该途径以IFN-γ依赖性的方式抑制侵入HeLa细胞的弓形虫的生长和复制。