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目的:观察芦荟多糖对体外培养人成纤维细胞增殖和胶原合成与分泌的影响,并探讨其在创面愈合过程中可能的作用机制。方法:1、体外培养人成纤维细胞随机分为芦荟多糖组(25, 50, 100, 200, 400mg/L)和对照组。倒置显微镜观察各组细胞的形态并拍照记录;通过MTT法检测各组细胞增殖状况,并绘制生长曲线;流式细胞技术检测细胞周期;通过AO-EB染色法检测成纤维细胞是否发生凋亡或死亡,以此反映芦荟多糖对人成纤维细胞是否有毒副作用;通过LDH漏出率检测反映细胞损伤程度。2、采用[~3H]-脯氨酸掺入法检测各组成纤维细胞DNA合成状况;采用RT-PCR法检测人成纤维细胞中I型、III型胶原mRNA表达情况;采用荧光免疫细胞化学染色法来检测体外培养人成纤维细胞中I、III型胶原蛋白的表达情况。3、ELISA法测定体外培养人成纤维细胞分泌I、III型胶原、透明质酸、羟脯氨酸的水平。结果:1、倒置相差显微镜观察到,各组人成纤维细胞形态基本相似;MTT检测芦荟多糖组细胞增殖活跃,较对照组有较高的增值。实验组G0/G1期细胞所占百分率显著下降,而G2/M期和S期细胞所占百分率显著上升(P <0.01);与对照组相比,实验各组染色结果显示核染色质着绿色并呈正常结构,为正常活细胞,未发生凋亡和死亡;实验各组的LDH漏出率均呈不同程度地下降(P <0.05)。2、与对照组比较,芦荟多糖作用人成纤维细胞后,促进细胞内胶原DNA合成、I型、III型胶原mRNA和细胞内胶原蛋白的表达明显增强(P <0.05)。3、与对照组比较,芦荟多糖作用成纤维细胞后,分泌I、III型胶原、透明质酸、羟脯氨酸明显增强(P <0.05),且呈剂量依赖性,I、III型胶原比值呈现明显下降趋势。结论:芦荟多糖可能通过促进人成纤维细胞增殖和促进I、III型胶原蛋白的表达合成及I、III型胶原、透明质酸、羟脯氨酸的分泌,并通过调节I、III型胶原比值,在创面愈合过程的细胞外基质形成中发挥重要作用。