【摘 要】
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木质素是一种芳香杂聚物,它是自然界中在总量上仅次于纤维素的天然有机高分子物质,已得到广泛的研究。本研究从中间锦鸡儿中克隆得到两个木质素合成途径上的肉桂酰辅酶A还原
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木质素是一种芳香杂聚物,它是自然界中在总量上仅次于纤维素的天然有机高分子物质,已得到广泛的研究。本研究从中间锦鸡儿中克隆得到两个木质素合成途径上的肉桂酰辅酶A还原酶基因,分别命名为CiCCR2和CiCCR3,并构建了植物表达载体,转化野生型拟南芥并获得纯合体株系,具体结果如下:(1)中间锦鸡儿CiCCR2基因开放阅读框长为897bp,gDNA共有4个内含子,分别长131bp、1351bp、176bp、222bp;编码299个氨基酸,推测的分子量为33.696KD,等电点为5.11,平均疏水指数(GRAVY)为-0.288;CiCCR3基因开放阅读框为966bp,gDNA 有 5 个内含子,分别长 829bp、856bp、197bp、522bp、1191bp,编码 322 个氨基酸,推测的分子量为35.91KD,等电点为6.01,平均疏水指数为-0.173。(2)构建过表达载体p35S::CiCCR2和p35S::CiCCR3,并转化野生型拟南芥Columbia-0,分别得到纯合体8个株系、9个株系。(3)过表达CiCCR2和CiCCR3基因的拟南芥,在成熟时期和幼苗时期木质素含量均高于野生型拟南芥组织化学染色也验证了转基因株系木质素积累较野生型拟南芥多。并且CiCCR2和CiCCR3过表达植株的鲜重和干重比野生型增加。
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