论文部分内容阅读
人参皂甙单体Rb1是人参二醇皂甙单体,研究表明人参皂甙保护心肌细胞,延缓运动疲劳等保健作用,但是对于人参皂Rb1对运动疲劳引起的心肌细胞凋亡是否具有具有抑制作用,却未见报道。本文主要通过建立大鼠游泳运动疲劳模型,采用腹腔注射人参皂甙单体Rb1的方法,对Rb1是否能够对抗运动疲劳产生的氧化应激现象导致心肌细胞凋亡进行研究。实验主要分为四组,分别为对照组,运动疲劳组,低浓度治疗组(Rb15mg/kg)和Rb1高浓度治疗组(Rb1 25mg/kg)。实验应用(1)Hoechst染色检测心肌细胞核形态变化:发现疲劳大鼠心肌细胞核呈现明显的凋亡趋势,注射Rb1后异常比率下降,且低浓度Rb1对心肌的保护作用更明显;(2)Tunel法测心肌细胞凋亡率:发现运动疲劳使心肌凋亡率增加,注射Rb1后凋亡率显著下降,分别降为:低浓度治疗组(3.48±0.72%)和高浓度治疗组(4.66±0.22%);(3)检测NADPH氧化酶活性:发现Rb1可降低疲劳大鼠NADPH氧化酶活性,与疲劳组相比,Rb1低浓度组酶活性减少了35.1%,Rb1高浓度组酶活减少24.8%;(4)检测心肌细胞中Ros活性:疲劳运动产生Ros导致氧化应激,损伤心肌细胞。Rb1降低Ros活性,经Rb1低浓度治疗后,与疲劳组相比Ros活性下降了25%,经Rb1高浓度治疗大鼠的Ros活性下降了18%。(5)测定凋亡蛋白caspase-3活性:运动疲劳激活了Caspase-3的活性,与对照组相比升高了71%,注射Rb1后凋亡蛋白活性下降,且经高浓度Rb1治疗大鼠与疲劳组相比含量下降22%,腹腔注射低浓度Rb1后下降20%。(6)钙瞬变测定:疲劳导致的氧化应激损伤细胞膜系统,造成细胞内钙离子紊乱,疲劳大鼠钙瞬变的幅度上升12%,心肌收缩力增强,但瞬变的下降时间延长,肌质网钙泵摄钙量减少,钙泵活性下降;腹腔注射人参皂甙Rb1能够降低钙瞬变的幅度,使时程亦有所缩短,保护运动中心肌组织,改善钙泵摄钙能力,减少钙离子积累。人参皂甙Rb1可以减少运动疲劳过程中物质氧化供能及其他氧化反应产生的内源性活性氧Ros,减少心肌细胞内Ca2+的积累,有效降低氧化应激水平,同时减少凋亡蛋白Caspase-3的表达,抑制心肌细胞凋亡;人参皂甙单体Rb1通过降低疲劳大鼠的NADPH氧化酶活性,进一步减少机体内活性氧含量,抑制大鼠心肌细胞凋亡。而且低浓度Rb1(Rb1 5mg/kg)对于运动疲劳引起的氧化应激导致的心肌细胞凋亡有更好的保护作用。