超顺磁性氧化铁标记猪骨髓间充质干细胞的体外MR成像研究

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背景:干细胞移植是现阶段医学领域的研究热点及研究前沿,在经过探索性的临床试验后,目前已常规应用于某些临床疾病治疗,尤以心血管及血液方面应用为广,且技术已进一步趋于成熟。但对于干细胞移植后的疗效观察目前常用的是移植后在离体状态下进行组织切片分析的方法,究竟活体状态下对移植入体内的干细胞可否进行实时监控呢?随着分子影像学的概念的提出,这一困扰临床医学工作者多年的问题有望得以解决。第一部分目的明确超顺磁性氧化铁(SPIO)粒子体外标记猪骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法、经MR成像的特征及可成像的最低标记细胞量。方法分离、纯化、培养猪MSCs,体外进行SPIO标记,对标记细胞行普鲁士蓝染色及荧光显微镜观察;测量并绘制未标记细胞和标记细胞的MTT生长曲线;选取不同的细胞量组进行标记后MR成像,测量不同扫描序列标记细胞管的信号强度改变,并进行统计学分析。结果该方法标记MSCs的有效率为100%,普鲁士蓝染色见细胞浆内有多少不等的蓝染铁颗粒;SPIO标记的MSCs在T2WI尤其是FFE(T2~*WI)序列信号明显降低;SPIO标记MSCs在T2WI及T2~*WI上与T1WI之间均有统计学意义;在25μg Fe/ml培养液标记浓度下,MR成像的最低细胞量为1×10~5。结论该方法可以简便标记MSCs并且在适当浓度下对MSCs的生物学活性没有影响,MR T2WI和T2~*WI序列可敏感显像磁性标记的干细胞。目的明确不同种类超顺磁性氧化铁(SPIO)体外标记诸骨髓间充质干细胞(MSCs)的标记效果及经MR成像的效果差异。方法分离、纯化、培养猪MSCs,体外进行不同种类SPIO标记,对标记细胞行普鲁士蓝染色及荧光显微镜观察;选取1×10~6细胞量组进行标记后MR成像,测量不同扫描序列标记细胞管的信号强度改变,并进行统计学分析。结果不同种类SPIO标记下,Feridex与1~#、3~#USPIO标记有效率皆为100%,而2~#USPIO标记效果稍差,标记有效率约98%;2~#、3~#USPIO与Feridex在T2WI及T2~*WI上有统计学差异,而1~#USPIO与Feridex在T2WI及T2~*WI上无明显统计学差异。结论我们自行研制的超微型超顺磁性氧化铁(USPIO)可有效标记骨髓间充质干细胞(MSCs),各SPIO标记干细胞之间有效率及信号强度的差异与铁颗粒大小之间并无明确的线性关系。
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