乳腺癌患者外周血CK-7、CK-20、hMAM、C-erbB-2、VEGFR-1、VLA-4的表达研究

来源 :遵义医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:leijian_118
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目的:应用RT-PCR技术检测乳腺癌患者外周血中的细胞角蛋白7(Cytokeratin-7,CK-7)、细胞角蛋白20(Cytokeratin-20,CK-20)、人乳腺珠蛋白(humanmammaglobin,hMAM)、C-erbB-2、血管内皮生长因子受体1(vascularendothelial growth factor acceptor 1,VEGFR-1)、黏附分子非常延迟抗原4(adhesion molecules of very late antigen 4,VLA-4,又名integrina<,4>β<,1>,即整合素a<,4>β<,1>),评价这些标志物与临床的关系,探索它们在微转移中的意义。 方法:本研究共收集标本202例,取自2004年12月至2006年12月我院附属医院所收治韵40例乳腺癌患者,44例肺癌、21例鼻咽癌、17例消化道肿瘤、13例生殖道肿瘤、11例恶性淋巴瘤、9例泌尿道肿瘤、6例头颈部其他肿瘤、5例肝胆肿瘤、5例其他肿瘤、10例乳腺增生、纤维腺瘤等良性乳腺疾病患者,并以21例健康志愿者作对照,MCF-7乳腺癌细胞系作实验敏感性指标。取外周血分离收集淋巴细胞,提取RNA,以GAPDH为内参照,RT-PCR技术检测CK-20、hMAM、C-erbB-2、VEGFR-1、VLA-4;同时,在检测目的基因引物特异性基础上,通过SYBR Green荧光定量技术对CK-7的相对表达水平进行分析。统计学方法:以卡方检验和四格表确切概率法分析。 结果: (1)敏感性测定:内参GAPDH和目的基因CK-7、CK-20、C-erbB-2的敏感性为10<7>,VEGFR-1为10<-6>,hMAM为10<-5>, MCF-7细胞不表达VLA-4。 (2)定性分析:①正常健康对照、乳腺良性疾病、恶性淋巴瘤均不表达VEGFR-1。正常健康对照CK-7、CK-20、C-erbB-2、VLA-4的相对表达水平分别为28.57%(6/21)、4.76%(1/21)、19.05%(4/21)、9.52%(2/21);乳腺良性疾病病人CK-7、CK-20、C-erbB-2、hMAM、VLA-4的相对表达水平分别为20.0%(2/10)、10.0%(1/10)、40.0%(4/10)、10.0%(1/10)、10.0%(1/10)。②乳腺癌CK-7的相对表达水平为90.0%(36/40)、CK-20为77.5%(31/40)、C-erbB-2为82.5%(33/43)、VLA-4为57.5%(23/43),高于鼻咽癌、消化道肿瘤、恶性淋巴瘤、乳腺良性疾病和正常对照的表达(P<0.05);乳腺癌CK-7、CK-20、C-erbB-2的表达也高于生殖道肿瘤、其他肿瘤(P<0.05);乳腺癌CK-7、C-erbB-2、VLA-4的表达高于肺癌(P<0.05):乳腺癌CK-7、CK-20、VLA-4的表达高于头颈部其他肿瘤(P<0.05):乳腺癌CK-20、C-erbB-2、VLA-4的表达高于泌尿道肿瘤(P<0.05):乳腺癌hMAM的表达在各肿瘤和乳腺良性疾病、正常健康对照间无显著差异,仅泌尿道肿瘤hMAM的表达明显高于乳腺癌(P<0.001);2.5%的乳腺癌(1/40)和29.55%的肺癌(13/44)可表达VEGFR.1,肺癌显著高于乳腺癌(P<0.001)。③各标志物在乳腺癌、肺癌、鼻咽癌各期中的表达无显著差异。 (3)CK-7相对定量分析结果表明,①Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期的乳腺癌、肺癌、鼻咽癌的CK-7相对表达量逐渐升高,乳腺癌Ⅳ期CK-7的相对表达量最高。②对同一病人进行动态观察发现a.术前表达高于术后。b.出现转移或复发时相对表达量增加。c.肿块缩小或病情稳定时相对表达量减少。 结论:(1)用RT-PCR方法检测乳腺癌患者外周血中的肿瘤标志物,在乳腺癌微转移诊断及预后判断中具有重要意义。(2)CK-7、CK-20、C-erbB-2、VLA-4、VEGFR-1可以作为外周血检测乳腺癌微转移的敏感标志物。(3)CK-7可以作为上皮性肿瘤治疗效果的动态监测指标。(4)hMAM不能作为乳腺癌微转移的标志物。(5)采用RT-PCR方法检测乳腺癌患者的微转移,相对定量分析较定性分析敏感,且可以对肿瘤治疗效果进行动态监测。
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