【摘 要】
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目的在心肌缺血再灌注损伤中,心肌细胞的凋亡影响着再灌注治疗后心功能恢复,其主要影响因素为能量供应失调、DNA损伤及功能蛋白合成紊乱。由真核细胞延长因子2（e EF2）介导多肽
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目的在心肌缺血再灌注损伤中,心肌细胞的凋亡影响着再灌注治疗后心功能恢复,其主要影响因素为能量供应失调、DNA损伤及功能蛋白合成紊乱。由真核细胞延长因子2（e EF2）介导多肽链的合成在心肌缺血再灌注损伤中发挥非常重要的作用,其非磷酸化活性状态促进多肽链的延长,而eEF2磷酸化失活状态对心肌细胞凋亡的影响仍不明确。本文拟探究eEF2在心肌缺血再灌注损伤进程中对凋亡的作用机制。方法SD大鼠通过暂阻断冠状动脉左前降支,在体内诱导心肌缺血再灌注损伤（MIRI）模型,通过心电图改变及伊文氏蓝/TTC双染确定模型建立成功。使用H9c2心肌细胞系,通过3%O2低氧及常规培养,构建低氧-再氧合模型（H/R）,通过CCK-8及流式细胞计数明确模型建立。eEF2、磷酸化eEF2、SUMO、Bax以及Bcl2蛋白表达及定位检测通过Western blot、免疫组化、免疫荧光确定,eEF2截短质粒表达及定位亦通过上述方法验证。结果1、在大鼠MIRI及H9c2细胞系H/R模型中,磷酸化eEF2（p-eEF2）与eEF2比值在再灌注组中先下降后升高,在再灌注4h时达到正常组水平（P均<0.05）。2、在大鼠MIRI及H9c2细胞系H/R模型中,p-eEF2在再灌注时均发生一定程度的核转位现象。3、在H/R模型中,发生SUMO化修饰的eEF2引发核内修饰作用明显强于核外（P均<0.05）。4、在构建截短突变的基础上,发现N-端片段发生核转位,并且通过抑制细胞周期,促进细胞凋亡发生。结论1、eEF2磷酸化与MIRI进程相关。2、在MIRI进程中,eEF2磷酸化表型发生SUMO化修饰。3、eEF2发生入核后能够通过促进细胞核不稳定性从而引发细胞凋亡。
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