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目的:1.建立石榴皮安石榴苷的纯化工艺并进行实验室放大试验。2.研究石榴皮安石榴苷与石榴皮多酚(含安石榴苷40.70%)对人前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用及可能机制。3.确定石榴皮安石榴苷的半数致死量。方法:1.以安石榴苷含量为指标,采用单因素分析方法筛选出石榴皮安石榴苷的纯化工艺。2.采用细胞形态学观察与MTT法测定不同浓度石榴皮安石榴苷与石榴皮多酚作用不同时间对人前列腺癌PC-3细胞生长的影响,应用流式细胞仪检测不同浓度石榴皮安石榴苷与石榴皮多酚作用48 h后PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况,将两者结果进行对比,并与阳性对照药氟他胺比较。3.采用单次给药毒性试验确定石榴皮安石榴苷的半数致死量。结果:1.石榴皮安石榴苷的纯化工艺为:石榴皮粉碎后过80目筛,按料液比1:24加入60%乙醇,室温浸提30 min,纱布滤过,滤液减压浓缩至无醇味,加蒸馏水稀释至20.8 mg/mL,用1.2 mol/L盐酸调pH为2,选用HPD500型树脂,以2 BV/h动态吸附速度上样5 BV,静置12 h,用7 BV蒸馏水及5 BV 5%乙醇除杂、6 BV 10%乙醇以4BV/h速度洗脱,收集10%乙醇洗脱液,减压浓缩,冷冻干燥,即得。2.石榴皮安石榴苷与石榴皮多酚对人前列腺癌PC-3细胞生长均有明显的抑制作用,且均呈剂量与时间依赖性:石榴皮安石榴苷对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用优于石榴皮多酚(P<0.05),而与阳性对照药氟他胺的抑制作用差异无统计学意义(P>0.05);石榴皮安石榴苷与石榴皮多酚可明显诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,且均呈剂量依赖性;在质量浓度为400、800 μg/mL时的早期凋亡率,石榴皮安石榴苷组要优于石榴皮多酚组,差异有统计学意义(P<0.05);石榴皮安石榴苷与氟他胺在质量浓度为200、800 μg/mL时的早期凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);石榴皮安石榴苷、石榴皮多酚及氟他胺使得G0/G1期的细胞比例呈现增加趋势,S期细胞比例明显减少,当质量浓度为400、800 μg/mL时,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。3.石榴皮安石榴苷的半数致死量(LD50)为2615.6 mg/kg,其95%可信限范围为2336.5～2919.9 mg/kg。结论:1.经大孔吸附树脂纯化后的石榴皮安石榴苷中的安石榴苷含量大幅度提高,该方法简单易行,为进一步工业生产奠定了试验基础。2.石榴皮安石榴苷在体外明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡且干扰细胞周期,将人前列腺癌PC-3细胞阻滞在Go/G1期,使细胞增殖周期延长,增殖速度减慢。3.随着提取物中安石榴苷含量增加,其半数致死量降低,其毒性大小可能与安石榴苷的含量有关。