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本实验以体外培养的SD乳鼠颅骨成骨细胞(OB)第3代为实验对象,依据三氯化铝(AlCl3)对OB的半数抑制浓度(IC50),设立4个实验组,即空白对照组(CG)、低剂量染铝组(LG,1/20IC50)、中剂量染铝组(MG,1/10 IC50)、高剂量染铝组(HG,1/5 IC50);向各组培养液中加入三氯化铝(AlCl3·6H2O)溶液,其终浓度分别为0 mg/mL、0.06 mg/mL、0.12 mg/mL、0.24 mg/mL,培养24h。应用AO/EB双重荧光染色法检测OB凋亡形态,并统计凋亡率;qRT-PCR法检测OB Fas、FasL、FADD、Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达;Western blot检测OB Fas、FasL、FADD、CytC、Bid和tBid蛋白表达;Caspase活性检测试剂盒检测OB Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3活性。旨在探讨三氯化铝致OB凋亡的Fas-线粒体信号转导机制。实验结果表明:(1)染铝组OB均可见细胞核呈现点状亮绿色的早期凋亡细胞,细胞核染为亮橘红色的晚期凋亡细胞,与细胞核为红色的坏死细胞;随染铝剂量的增加,OB凋亡数目增多,染铝组OB凋亡率显著高于CG(P<0.01),表明AlCl3可诱导OB凋亡。(2)染铝组OB Fas、FasL、FADD mRNA及蛋白表达量,Caspase-8 mRNA表达量及Caspase-8活性均显著高于CG(P<0.05;P<0.01),说明Fas/FasL信号通路参与了AlCl3诱导的OB凋亡。(3)染铝组OB胞浆中CytC蛋白表达量、Caspase-9 mRNA表达量及Caspase-9活性均显著高于CG(P<0.01),说明线粒体信号通路参与了AlCl3诱导的OB凋亡。(4)染铝组OB Bid mRNA及蛋白表达水平、tBid的蛋白表达水平、Caspase-3 mRNA表达量及活性均极显著高于CG(P<0.01),说明AlCl3通过Fas和线粒体信号通路激活Caspase3诱导OB凋亡,Fas凋亡信号转导通路可能通过活化Bid作用于线粒体,导致线粒体凋亡信号激活。