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胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)是我国特有的珍稀鱼类,研究其耳石微结构特征将推动其早期生活史阶段的年龄生长、死亡率、补充量、种群识别等方面的研究。2003年从宜宾水陆生珍稀动物研究所采集了人工繁殖的胭脂鱼仔鱼,2004和2005年分别从四川省农科院水产研究所、重庆万州水产研究所采集人工繁殖的胭脂鱼受精卵,带回实验室孵化、饲养。本文研究了胭脂鱼仔、稚鱼的耳石微结构特征,确证了耳石日轮,探讨了营养条件、光照和温度对胭脂鱼耳石生长轮沉积的影响,并探索了对胭脂鱼仔鱼进行大规模标记的耳石标记方法。主要结果如下:
1.仔鱼的耳石上可观察到原基、中心核和生长轮等。耳石原基一般为1~2个,少数有3~4个;中心核一般为1个,少数具有双中心核。初孵仔鱼耳石形状不规则,待生长轮沉积开始后耳石变为圆形。随着仔鱼的发育,微耳石逐渐变形,在第24d观察到的耳石形状变为蚌状,耳石中心稍偏向一端;矢耳石的形状经历了从圆形到两端略突到梨形的变化,在第24d的时候两端略突,到第29d时候变为梨形。
2.刚出膜的胭脂鱼仔鱼耳石上未形成生长轮,出膜后第二天矢耳石和微耳石上均形成第一个轮纹,之后每天形成一个轮纹。生长轮数与日龄呈线性相关,相关方程为:矢耳石,N=-0.41219+0.967497D(r<2>=0.97929,n=312,P<0.001);微耳石,N=0.7471+0.85618D(r<2>=0.96951,n=311,P<0.001)。统计检验表明,回归斜率和1.0无显著差异(t-test,矢耳石,P=0.301449;微耳石,P=0.516926),可确认胭脂鱼耳石生长轮具有日沉积规律,为日轮。胭脂鱼仔鱼多数耳石上存在标记轮,均出现在内源营养期,但三批胭脂鱼仔鱼耳石标记轮位置略有差异,其中万州样本标记轮多出现在第3-5轮,四川省水产研究所样本多出现在第1-4轮,宜宾水陆生珍稀动物研究所样本多位于第1-2轮。
3.胭脂鱼仔、稚鱼耳石半径(R)与体长(L)成线性相关,相关方程为:矢耳石,R=-383.63+36.2746L,(r<2>=0.95755,n=65,P<0.001);微耳石R=-180.06+18.5987L,(r<2>=0.95661,n=65,P<0.001)。
4.营养条件可能影响胭脂鱼耳石的生长轮沉积。主要表现在:(1)当食物不足时,仔鱼体长同耳石半径之间的相关性降低;(2)在完全饥饿条件下生长的仔鱼,卵黄囊完全吸收后耳石日轮宽度变窄,在光学显微镜下检测到的日轮数小于生长天数;(3)投饵频率不影响耳石生长轮的沉积率。
5.水温对胭脂鱼仔、稚鱼耳石日轮有较大的影响,表现在:(1)昼夜温度波动影响日轮的清晰度和对比度,在恒温条件下饲养仔鱼的耳石上几乎观察不到轮纹;当昼夜温差较小时,耳石轮纹清晰度和对比度都较低;饲养水温昼夜波动大时,耳石上沉积的生长轮清晰度和对比高。(2)温度周期影响耳石的生长轮数目,自然条件下,在一个24h的温度周期内形成一个轮纹,但当改变温度周期为12h、36h、48h时,相应地耳石在12h、36h、48h的时间内形成一个轮纹,而不再是每天形成一个轮纹,这点可用于对胭脂鱼耳石的热(3)耳石大小(R)与仔、稚鱼所经历的积温(T)呈正相关,相关方程为:矢耳石,R=-10.204+0.466384T,(r<2>=0.97903,n=64,P<0.001);微耳石:R=12.017+0.236536T,(r<2>=0.98048,n=63,P<0.001)。
6.光照周期的改变不影响胭脂鱼仔鱼耳石日轮的形成。
7.利用荧光物质对胭脂鱼仔鱼浸泡可在其耳石上形成荧光标记环,标记效果同荧光物质、浸泡浓度和鱼龄等因素相关。实验表明,利用150mg/L茜素络合物(Alizarin complexone,ALC)溶液浸泡胭脂鱼仔鱼2h以上均可取得很好的标记效果;当浸泡液浓度相同时,同龄不同个体之间标记环荧光反应强度差别不大,不同日龄阶段标记效果则相差很大,低龄个体标记环荧光反应较强。