论文部分内容阅读
目的：研究巨噬细胞在生长追赶宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠脂肪细胞中的浸润，IL-6、TNF-α细胞因子分泌和炎症反应NFκB、JNK信号通路在胰岛素抵抗中发挥的作用。方法：清洁级雌性Sprague-Dawley大鼠（SD大鼠）按3：1比例合笼，受孕后随机分为限食组和正常组，限食组母鼠怀孕期间给予正常怀孕母鼠30%的食量，所生仔鼠即为建立的IUGR幼鼠模型。增加哺乳期IUGR仔鼠营养摄入建立生长追赶(catch-up growth, CG) IUGR (IUGR-CG)大鼠的模型。取8周龄的SD大鼠的附睾脂肪垫、肾周的脂肪组织进行石蜡切片和脂肪细胞的原代培养，并与原代培养的腹腔巨噬细胞利用Transwell系统细胞共培养，细胞共培养24h后取细胞培养液上清用ELISSA法测定IL-6、TNF-α细胞因子水平，以Real-Time PCR和Western-Blotting法检测巨噬细胞NFκB、JNK mRNA以及蛋白水平的变化。免疫组化方法测定脂肪组织中浸润的巨噬细胞特异性标志物F4/80的表达。结果：IUGR组幼鼠0周、1周时体重、身长、体块指数均小于对照组(p＜0.01)，于生后第2周即实现生长追赶，体重和BMI高于对照组(p＜0.01)。脂肪组织石蜡切片免疫组化染色中，8周龄IUGR-CG大鼠脂肪组织中黄褐色沉淀较对照组明显增多。IUGR-CG组共培养细胞体系细胞分泌IL-6、TNF-α炎症因子较对照组明显增高（二者均p<0.01）。IUGR-CG组原代共培养的巨噬细胞NFκB、JNKmRNA表达明显增高（二者均p<0.01），相应的NFκB、JNK蛋白水平也较对照组明显上调（p<0.01和p<0.05）。结论： IUGR-CG大鼠脂肪组织存在炎症反应，脂肪组织中巨噬细胞浸润明显，在脂肪细胞和巨噬细胞相互作用影响下炎症因子IL-6、TNF-α分泌及NFκB、JNK信号通路表达增加，促进胰岛素抵抗的发生。