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目的:观察奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)对野生型肝癌细胞株HepG2、突变型肝癌细胞株HuH-7体外增殖和周期的影响,同时观察CyclinD1、CDK2、CDK4、p16、p21、p53表达的变化,为其应用于原发性肝细胞癌的临床治疗提供理论依据。方法:采用人肝癌细胞株HepG2、HuH-7作为研究对象,MTT法检测不同浓度和不同作用时间的L-OHP对细胞增殖的抑制效应;倒置显微镜观察L-OHP作用后细胞形态的改变;流式细胞术(FCM)检测L-OHP诱导HepG2、HuH-7细胞周期阻滞的作用;RT-PCR检测L-OHP作用后,细胞周期调节因子CyclinD1、CDK2、CDK4、 p16、p21、p53在转录水平的表达变化;Western blot方法观察L-OHP对CyclinD1、CDK2、CDK4、 p16、p21、p53蛋白表达水平的影响。结果:1. MTT结果显示L-OHP对HepG2、HuH-7细胞增殖抑制率随药物浓度增加及作用时间延长有升高趋势,呈时间剂量依赖性。2. L-OHP作用后,细胞形态发生改变,细胞变圆、脱壁,并聚集成团。3.流式细胞术检测到L-OHP能够诱导HepG2、HuH-7细胞阻滞于细胞周期的S期,两种细胞S期细胞的比例均随浓度增加和时间延长而显著增多。4. L-OHP作用后HepG2、HuH-7细胞mRNA水平的表达改变:(1)L-OHP下调HepG2、HuH-7细胞CDK4和CyclinD1的表达。(2)L-OHP上调两种细胞p21的表达。(3)对两种细胞CDK2和p16表达均无明显改变。(4)对HepG2细胞L-OHP能上调p53表达,而对HuH-7细胞L-OHP低浓度上调p53表达而高浓度下调p53表达。5. L-OHP作用后,两种细胞蛋白表达水平与mRNA水平是一致的。结论: L-OHP能有效抑制人肝癌细胞的增殖并能够引起肝癌细胞阻滞于S期,其分子机制与CDK4、CyclinD1、p21及p53的表达变化有关。这些分子机制有助于我们进一步了解L-OHP的抗肝肿瘤活性,从而为L-OHP治疗肝癌提供实验基础。