目的 冻干保存血小板,保证冻干之前的血小板质量和功能是关键,本研究旨在建立血小板冻干前的一系列处理技术,包括血小板的海藻糖负载条件和负载溶液组成。目的是使海藻糖进入血小板内,同时避免血小板的激活损伤,保存血小板功能。方法 运用硫酸-蒽酮法和0.5M三氯乙酸（Cl₃COOH）沉淀蛋白等方法,建立血小板胞内海藻糖定量测定方法并研究负载海藻糖的基本条件,如负载温度、负载浓度、负载时间和负载环境;运用流式细胞分析（FCMs）测定血小板膜表面CD62p和PAC-1的表达及再表达率,APACT-2聚集仪测定各种诱导剂诱导的血小板最大聚集率（PAgT）,薄片法测定血小板被诱导聚集的时间（SPAT）,血细胞计数仪测定血小板计数（PLT）和平均体积（MPV）等方法,研究腺苷（adnosine）、前列腺素E₁（prostaglandin E₁,PGE₁）、左旋精氨酸（L-arginine）、西洛他唑（Cilostazol）、植酸钠（sodium phyticacid）和百维利肽（Bivalirudin）等血小板激活抑制剂在血小板负载海藻糖过程对血小板激活损伤的保护作用。并结合血小板海藻糖负载环境进行正交实验,优选最佳的负载液组成,可逆性抑制血小板的激活损伤,保存血小板功能。结果（1） 建立了血小板胞内海藻糖测定方法,初步确定37℃,海藻糖浓度45mM,在血浆中负载4h,为血小板负载海藻糖的基本技术条件。（2） 海藻糖负载后,血小板平均体积（MPV）未发生明显改变,但血小板CD62p和PAC-1表达率显著增加;在缓冲液中负载海藻糖过程对瑞斯托菌素（ristocetin）和二磷酸腺苷诱导（ADP）的血小板聚集有一定影响,聚集抑制率为10%和23%,对凝血酶（thrombin）诱导的聚集抑制不明显;在血浆中负载海藻糖对血小板聚