产氢产乙酸菌互营共培养体B6的选育及其菌群组成的优化

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuxuan1991
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在厌氧消化系统中,营养生态位上位于产酸发酵菌群和产甲烷菌群之间的产氢产乙酸菌群,因其具有与耗氢菌互营共生的特性,其分离培养十分困难,种子资源十分匮乏,限制了基于强化产氢产乙酸功能作用的高效厌氧生物处理技术的开发。比较而言,产氢产乙酸菌互营共培养体的分离和筛选则相对简单,种子资源更易获得,可望成为开发基于强化产氢产乙酸功能作用的高效厌氧生物处理技术的突破口。论文在对前期获得的7个产氢产乙酸菌互营共培养体复壮的基础上,通过培养实验探明了其群体生长规律,并进一步确定了最佳接种时间为群体培养的4896 h;通过生理生化实验和产氢产乙酸代谢强度的研究和比较,从中优选出一个以丙酸为基质时增殖和产氢产乙酸代谢能力最强的互营共培养体B6。从优化产氢产乙酸菌互营共培养体培养条件的角度出发,研究并设计了产氢产乙酸菌的基础培养基,并探讨了温度、pH、排气方式、接种比例对共培养体B6的生长代谢和产氢产乙酸能力的影响。结果表明,在42.5℃、pH 7.2、常压排气、接种菌悬液与液体培养基的体积比为4:10的条件下,共培养体B6可表现出最佳的底物转化、增殖和产氢产乙酸能力。为强化产氢产乙酸互营共培养体B6的产氢产乙酸作用,通过研究确定了B6的优育培养基、传代培养方法和培养条件,并获得了菌群组成更加简单、产氢产乙酸代谢特性更加突出的互营共培养体B6-8c。PCR-DGGE技术分析表明,互营共培养体B6-8c中只有4种细菌存在,比B6减少了3种。菌群组成分析表明,B6-8c与B6均含有专性的互营产氢产乙酸菌Peptococcus sp.及其伴生菌,其中的伴生菌为铁还原细菌Clostridium sp.,在代谢过程中不产生CH4或H2S,但却有剩余的氢气和乙酸。B6-8c剔除了原来B6中含有的诸如产氢产乙酸菌的共生菌:能利用乙酸和氢气的Sedimentibacter sp.和能降解氨基酸、苯甲酸、甲苯等的细菌Clostridium hydroxybenzoicum。
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