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目的:制备还原敏感型聚氨基酸纳米凝胶,并研究其理化特性,体外细胞摄取程度,细胞毒性,体内黏附性渗透性,组织分布情况及化疗效果。方法:制备还原敏感的聚氨基酸纳米凝胶载体负载10-羟基喜树碱(10-Hydroxycamptothecin,HCPT)。对制备的纳米凝胶载药复合体(NG/HCPT)进行基本表征,如测定其形貌,流体力学半径(hydrodynamic radius,R_h)、表面电位及体外释放情况。通过激光共聚焦显微镜和酶标仪检测膀胱癌T24细胞对NG/HCPT的摄取程度及细胞内药物释放情况,MTT法及流式细胞术检测NG/HCPT对膀胱癌T24细胞的毒性作用;用N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝基胺水溶液喂养雄性BALB/c小鼠,建立原位膀胱癌模型,经尿道膀胱灌注化疗药物,利用激光共聚焦显微镜观察NG/HCPT在膀胱壁表面的黏附作用、渗透到膀胱壁的深度,利用高效液相色谱法测定药物在体内重要组织的分布情况,治疗结束后,分离膀胱组织,切片,经HE染色及免疫组化染色,分别在电子显微镜及激光共聚焦显微镜下行组织病理学分析及对肿瘤细胞生长抑制情况评估。结果:制备的载药纳米凝胶呈球形,R_h为65.9±0.4 nm,表面电位值为+16.3±1.4 m V,生理条件下较稳定,还原条件下可迅速膨胀并释放出HCPT。24 h时,NG/HCPT对膀胱癌T24细胞的半数抑制浓度(IC50)为2.7 mg/L,明显低于游离HCPT的IC50(7.9 mg/L);游离HCPT和NG/HCPT诱导T24细胞早期调亡比率分别为3.5%和8.9%,晚期凋亡比率分别为12.0%和13.6%。在原位膀胱癌模型中,NG/HCPT具有较强的黏附性,且能穿透膀胱全层并滞留较长时间。NG/HCPT大量蓄积于膀胱组织内,而其他组织器官(心、肝、脾、肺、肾)的含量很少。治疗结束后,游离HCPT和NG/HCPT组出现肿瘤细胞核固缩、碎裂、消失,甚至不同程度的肿瘤坏死。NIS元素成像软件用来计算肿瘤坏死面积,NG/HCPT组高达46.3±2.2%,是游离HCPT组的3.8倍(p<0.01),而PBS对照组只有1.5±1.0%。NG/HCPT组多聚ADP核糖核酸聚合酶(poly-ADP-ribose polymerase,PARP)的荧光强度为游离HCPT组的2.2倍,NG/HCPT组增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的荧光强度是游离HCPT组的11.4%。结论:1、通过一系列的开环聚合反应以及随后的脱保护反应,成功地合成了具有还原敏感特性的带正电聚氨基酸纳米凝胶;2、与游离HCPT相比,NG/HCPT的还原敏感特性使其能在肿瘤细胞内精准释放HCPT并提高蓄积量,进而有效地发挥细胞毒性作用;3、NG/HCPT在体内具有较好的黏附性和渗透性,能有效抑制原位膀胱癌模型中肿瘤的生长,有望成为一种新剂型的抗肿瘤药物。