目的:本文旨在研究霍山石斛与药典收载石斛之间的生药学鉴别特征,并建立霍山石斛质量评价方法,为霍山石斛的栽培质量控制以及实际生产提供依据。方法:采用药材性状、显微、薄层色谱、高效液相色谱以及SSR分子标记等方法比较霍山石斛与药典收载石斛之间的异同;采用HPLC指纹图谱法结合相似度评价、聚类分析、主成分分析等方法来评价不同生长年限、不同栽培基地的霍山石斛药材质量差异;采用外标法测定不同生长年限霍山石斛中芦丁、石斛酚、丁香酸、柚皮素4种化学成分含量。结果:6种石斛药材的形状、大小、色泽、断面颜色等性状特征以及药材粉末颜色、粉末显微特征、高效液相指纹图谱、SSR分子标记结果都具有显著差异。不同生长年限栽培霍山石斛药材指纹图谱相似度结果均<0.900,不同年限仿野生霍山石斛药材指纹图谱的相似度均>0.900,随着生长年限的增加大棚栽培的霍山石斛药材指纹图谱的相似度呈上升的趋势;不同栽培基地的霍山石斛药材相似度结果均<0.900,聚类分析无法将不同栽培基地的霍山石斛药材聚成一类。4种化学成分含量测定结果表明3年生大棚栽培霍山石斛药材中4种化学成分含量最高,1年生和2年生大棚栽培霍山石斛药材中的4种化学成分的含量约为3年生的1/2-1/3;3年生仿野生栽培霍山石斛药材中4种成分含量高于1年生和2年生仿野生栽培霍山石斛药材,1年生和2年生仿野生栽培霍山石斛药材中的芦丁、石斛酚、柚皮素含量基本保持不变,不随生长年限的增长呈上升趋势;聚类分析将3年生大棚栽培霍山石斛药材聚为一类,其他生长年限的大棚栽培霍山石斛药材和仿野生栽培霍山石斛药材均聚为另一类。从16对引物的PCR扩增结果中筛选出两对具有特征扩增条带的引物。其中一对为c299343,在不同种石斛的PCR扩增中,霍山石斛在300bp位置能够扩增出特异性条带;另一对引物为c299343,霍山石斛1号品种能够扩增出两条条带,霍山石斛2号品种能够扩增出一条条带。结论:对霍山石斛与药典收载石斛之间的性状、显微、薄层、高效液相及分子鉴别研究中,发现霍山石斛药材与其他石斛药材之间具有差异性。一是霍山石斛药材枫斗具有的“龙头凤尾”特征、嚼之无渣;二是霍山石斛药材粉末为金黄色;三是霍山石斛薄层色谱中具有粉红色的条带;四是霍山石斛药材指纹图谱与其他石斛指纹图谱间的相似度差异显著;五是霍山石斛在不同种石斛的SSR分子标记中可以扩增出特异性条带。不同年限仿野生栽培霍山石斛药材整体质量较为稳定,不同年限的大棚栽培的霍山石斛质量随着生长年限的增加而趋于稳定。可能是由于目前霍山石斛大棚栽培体系尚未统一,不同栽培基地间的霍山石斛大棚栽培的种源、栽培基质、肥料等的不同导致大棚栽霍山石斛早期质量不稳定。而仿野生栽培霍山石斛由于仅受到自然环境的影响而无人为因素干扰的原因使其整体质量较为均一。大棚栽培的不同年限的霍山石斛茎中4种化学成分含量差异较大,其中三年生霍山石斛中4种化学成分含量均高于一年生和二年生霍山石斛,聚类分析结果也将化学成分含量最高的三年生霍山石斛聚为一类,验证了霍山石斛以三年生茎入药传统做法的科学性。霍山石斛不同种之间和不同品种之间都可以通过SSR分子标记技术进行准确鉴别,实验所采用的方法具有良好的重现性和稳定性。