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利用胞质分裂阻滞法(Cytokinesis-block analysis, CB法)能够观察到电离辐射照射的人外周血淋巴细胞中,双核细胞两主核间产生的异常核质连接,称为核质桥(Nucleoplasmic bridges,NPB)。NPB是电离辐射诱导染色体损伤的生物标志物,其形成机制是DNA断裂、错误修复、染色体重排或端粒末端融合。NPB的自发率较低,电离辐射诱导后发生频率与电离辐射剂量有较好的的剂量-效应关系,NPB水平分析实验操作简便,分析标准容易统一,且在相同实验条件下,辐射诱导人外周血淋巴细胞NPB水平与淋巴细胞中期分裂相双着丝粒染色体及着丝粒环(Dicentic chromosome + Centric ring, dic+r)的发生率呈正相关,提示NPB具备成为辐射生物剂量计的潜力。本研究在实验室前期工作基础上,利用CB法探讨性别、年龄对正常人群NPB的本底水平以及年龄、性别、吸烟与否等因素对于辐射诱导正常人群外周血淋巴细胞NPB水平的影响,为NPB成为辐射剂量计进一步提供研究依据。材料和方法1、在知情同意情况下,收集117例正常人(男性60例、女性57例)外周血样本,用于进行正常人群NPB本底水平的分析;收集48例正常人(男女各24例)外周血样本用于进行2Gy 60Co γ射线诱导后NPB、MN水平的分析。2、采用CB法分析正常人NPB本底水平以及2 Gy 60Co γ射线照射诱导正常人外周血淋巴细胞NPB水平,探索性别、年龄因素对正常人群NPB本底水平的影响,并探讨性别、年龄、吸烟等因素对于辐射诱导人外周血淋巴细胞NPB水平的影响。结果一、性别、年龄对正常人NPB、MN本底水平的影响1、117例正常人平均年龄为41.03±11.84岁,NPB本底水平为(0.45±0.22)×10-3/细胞,MN本底水平为(14.65±6.30) ×10-3/细胞。2、男性正常人NPB本底水平为(0.52±0.11)×10-3/细胞,女性正常人NPB本底水平为(0. 31±0. 21) ×l0-3/细胞,男性NPB本底水平显著高于女性(U= 3.13,p<0.01)。男性正常人MN本底水平为(13.88±4.53)×10-3/细胞,女性正常人MN本底水平为(15.39±8.44)×10-3/细胞,女性显著高于男性(U=-2.46,p<0.05)。3、男性平均年龄41.72±11.85岁,NPB、MN本底水平均有随年龄增加而增高的趋势。其中NPB本底水平仅20～与40～、50～年龄组间有统计学差异(U=4.23,p<0.01; U=-10.02, p<0.01) ; MN本底水平除40～与50～年龄组外,其余各年龄组间均存在统计学差异(U=3.71,p<0.01;U=5.27, p<0.01)。4、女性平均年龄40.31±11.91岁,NPB本底水平40～年龄组最高,且与20～、30～年龄组间有统计学差异(U=2.88,p<0.01;U=2.37, p<0.05),其余各年龄组间无显著性差异;女性正常人群外周血淋巴细胞MN本底水平有随年龄增加而增高的趋势,除40～与50～年龄组外,其余各组间均有统计学意义(U=6.99,p<0.01; U=10.66, p<0.01)。二、性别、年龄、吸烟等因素对2Gy60Co γ诱导正常人外周血淋巴细胞NPB、MN水平的影响1、48例正常人外周血样本经2Gy60Coγ射线照射,诱导人外周血淋巴细胞中NPB发生率为(34.51±11.66)×l0-3/ 细胞,MN发生率为(318.45±77.42)×10-3/ 细胞。2、2Gy 60Co γ射线诱导正常人外周血淋巴细胞NPB发生率,女性(34.80±10.50) ×10-3/ 细胞,略高于男性(34.19±13.00) ×10-3/ 细胞,但无显著性差异(U=-0.54, p>0.05)。3、48例正常人平均年龄为40.60±10.31岁。经2Gy60Coγ射线诱导正常人群外周血淋巴细胞NPB发生率随年龄无规律性变化;40～年龄组NPB发生率最高,且与20～、30～、50～各年龄组都有统计学差异(U=2.33, p<0.05; U=2.43,p<0.05; U=2.68,p<0.01) 。4、2Gy60Coγ射线照射后,吸烟组(5例)人外周血淋巴细胞NPB发生率((33.70±5.99) ×10-3/ 细胞)略低于不吸烟组((34.60±12.19) ×10-3/ 细胞),但两组间无统计学差异。2Gy 60Co γ照射诱导人外周血淋巴细胞中MN水平,吸烟组MN发生率为(281.60±41.35)×l0-3/细胞,低于不吸烟组(322.73±79.78)×10-3/细胞,且两组间MN发生率有统计学差异(U=-7.28, p<0.01)。结论1、在正常人外周血淋巴细胞中NPB自发率低于MN。男性NPB本底水平高于女性,提示性别对正常人外周血淋巴细胞中NPB本底水平有影响。2、男性正常人群外周血淋巴细胞NPB本底水平均随年龄增加而增高;女性正常人群外周血淋巴细胞NPB本底水平40～岁年龄组最高,且不同年龄组间存在差异,提示年龄对NPB本底水平有一定影响。3、吸烟因素对于2Gy 60Co γ射线诱导正常人外周血NPB发生率无显著性影响。4、性别对2Gy 60Co γ射线诱导正常人外周血NPB发生率无显著性影响。5、2Gy 60Co γ射线诱导正常人NPB水平40～岁年龄组与其他各组均有统计学差异,提示年龄对于2Gy 60Co γ射线诱导正常人外周血NPB发生率可能有一定影响。综上所述,性别和年龄影响正常人外周血淋巴细胞中NPB本底水平;但性别、吸烟等因素对电离辐射照射诱导的NPB发生率无显著性影响,年龄对其可能有一定影响。因此在应用NPB估算事故受照者辐射生物剂量时应关注年龄的影响,在低剂量范围内需要考虑年龄和性别的影响。