当前，关节软骨损伤的临床治疗手段有限，长期疗效也不理想。组织工程为软骨组织修复/再生带来可能，间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)被广泛应用于体外软骨组织构建。发育过程中，细胞之间相互作用是组织结构形成的关键因素。在软骨组织工程研究中，对于MSCs与关节软骨组织中的软骨细胞(Articular chondrocytes，ACs)之间的相互作用，目前的认识还很不清楚。尽管很多研究认为ACs可能指导MSCs的成软骨分化，但MSCs是否也会影响ACs的行为，还不得而知。体外细胞与细胞共培养，可以有效考察细胞间相互作用。因此，本研究将MSCs与ACs进行共培养，来详细探讨MSCs对ACs表型的影响作用。　　 本研究主要包括两个方面的研究工作，其一，以新西兰大白兔为实验动物，分离获得了兔骨髓间充质干细胞(rabbit MSCs，rMSCs)和关节软骨细胞(rabbit ACs，rACs)，体外传代培养考察rACs的生长特性;其二，利用Transwell培养系统考察MSCs对rACs表型的调控，主要展开了以下几个层次的探索:①细胞培养方式，MSCs和rACs分别为二维单层培养或经海藻酸钙水凝胶包埋后三维培养;②rACs预培养时间，预先培养1天(T1)或者3天(T3)后与MSCs共培养;③共培养时间;④不同来源的MSCs，包括rMSCs和人羊膜间充质干细胞hMSCs;⑤考察了使用MSCs条件培养基(Conditioned medium)与rACs共培养的作用。同时，对rACs的表征主要包括了三个方面:细胞形态、基质分泌和基因表达。　　 结果发现:rACs在体外传代培养过程中发生了显著的去分化现象，表现在细胞形态由小且多角形或铺路石状，逐步转变大且为成纤维细胞样的梭形形态，胞外基质（氨基聚糖，Glycosaminoglycans，GAG）分泌减少，软骨相关特性基因（包括COL2A1，Aggrecan和Sox9等）表达水平下调;与MSCs共培养，促进了二维单层rACs的形态向梭形转变，而抑制了三维中rACs细胞聚团现象，rACs胞外基质分泌显著下降，基因表达也发生了明显变化，包括软骨特性基因的表达下调;不同来源的MSCs都表现出对rACs表型抑制的作用，尽管hMSCs的作用效果相对较低;最后，MSCs条件培养基也同样能够对rACs产生同样的作用，表明其可能是通过MSCs的旁分泌效应来实现。　　 总而言之，rACs体外培养过程中会逐步去分化，而MSCs的存在能够加速rACs的去分化，可能是源于MSCs的旁分泌效应，但是，至于何种分子介导了这样的作用，还有待进一步的研究。通过本研究工作，我们证实了MSCs对ACs的细胞表型产生显著地调节作用，为基于MSCs进行软骨组织损伤的修复/再生的研究提供了重要的科学启示。