【摘 要】
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目的:研究正常胎盘和子痫前期胎盘血管中Angiotensin1-7与Ang Ⅱ的相互作用,并探讨其在子痫前期发病过程中可能的作用机制。方法:报告伦理委员会经过批准后,在产妇就诊时告知其本研究的进行,征得病人及其家属同意并签署知情同意书后,收集自然妊娠孕期正常（无任何围产期并发症）及自然妊娠孕期发生子痫前期（除子痫前期外无其他围产期并发症）产妇的胎盘和外周血。分离出胎盘血管并切成大小合适的血管环,进
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目的:研究正常胎盘和子痫前期胎盘血管中Angiotensin1-7与Ang Ⅱ的相互作用,并探讨其在子痫前期发病过程中可能的作用机制。方法:报告伦理委员会经过批准后,在产妇就诊时告知其本研究的进行,征得病人及其家属同意并签署知情同意书后,收集自然妊娠孕期正常（无任何围产期并发症）及自然妊娠孕期发生子痫前期（除子痫前期外无其他围产期并发症）产妇的胎盘和外周血。分离出胎盘血管并切成大小合适的血管环,进行微血管张力检测实验,测定孵育Angiotensin1-7后胎盘血管对累积浓度AngⅡ的反应,检测两者的相互作用。使用MAS1R阻断剂A779和AT2R阻断剂PD对相互作用机制进行研究。收集胎盘血管组织,提取组织RNA和蛋白质。使用荧光定量PCR实验,免疫印迹等方法检测胎盘血管中AngⅡ、Angiotensin1-7相关受体基因AGTR1、AGTR2、MAS1以及相关通路分子的mRNA和蛋白质表达水平。部分分离后的血管置于4%多聚甲醛中固定后进行苏木素-依红（HE）染色观察胎盘血管的形态学改变。收集孕妇外周血和胎盘组织,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测胎盘组织及孕妇血清中Angiotensin1-7和ACE2水平。结果:形态学结果显示子痫前期胎盘血管动脉中层明显增厚,平滑肌细胞明显增生,且平滑肌排列紊乱。正常胎盘血管中,Angiotensin1-7对AngⅡ引起的血管收缩有明显的抑制作用,且孵育Angiotensin1-7特异性受体MAS1R拮抗剂A779及AngⅡ受体AT2R拮抗剂PD后无法抑制Angiotensin1-7的作用;而子痫前期胎盘血管中Angiotensin1-7对AngⅡ引起的血管收缩没有明显抑制作用。子痫前期胎盘血管AGTR1基因的mRNA表达明显降低。MAS1基因mRNA表达明显降低,但其蛋白表达水平两组间没有明显差异。β-arrestin通路相关分子ARRB1、ARRB2检测未见两组有明显差异。与正常胎盘相比,子痫前期胎盘血管组织细胞核ERK蛋白磷酸化水平明显降低,而细胞质中ERK蛋白磷酸化水平明显升高。酶联免疫吸附试验结果显示两组孕妇血清和胎盘组织中Angiotensin1-7和ACE2水平均无差异。结论:子痫前期组胎盘血管动脉中层明显增厚,平滑肌细胞明显增生,且平滑肌排列紊乱,Ang Ⅱ具有促进增殖的作用,Angiotensin1-7有抗增殖的作用,因此组织学结果提示子痫前期中RAS组分Ang Ⅱ和Angiotensin1-7功能可能失去平衡;子痫前期胎盘血管对Ang Ⅱ诱导的收缩反应明显减弱,这可能与子痫前期胎盘血管中AGTR1表达降低有关。Angiotensin1-7对正常胎盘血管中Ang Ⅱ诱导的收缩反应有明显的抑制作用,而在子痫前期胎盘血管中不发挥抑制作用。孵育Angiotensin1-7特异性受体MAS 1阻断剂A779及Ang Ⅱ受体AT2R阻断剂PD后不能抑制Angiotensin1-7对Ang Ⅱ诱导的收缩反应的抑制作用,提示Angiotensin1-7并不是通过MAS1R及AT2R发挥作用,而可能是通过AT1R发挥作用,即在胎盘血管中Angiotensin1-7是AT1R受体的内源性β-arrestin偏好性配体。虽然β-arrestin通路相关分子ARRB1、ARRB2检测未见两组有明显差异,但其下游ERK蛋白磷酸化水平在两组胎盘血管组织细胞核和细胞质中的差异性改变提示两组间血管反应差异与β-arrestin通路改变相关。胎盘及非胎盘血管功能试验表明Angiotensin1-7对于PE和5-HT类药物引起的收缩反应不产生抑制作用,表明Angiotensin1-7对Ang Ⅱ发挥特异性抑制作用。
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