果皮色泽是苹果果实重要的外观品质之一,也是衡量果实中商品价值的一个重要指标。苹果果皮颜色的差异与果皮中花色素苷含量密切相关。光是果实生长的微环境中,诱导苹果果皮花色素苷生物合成的必要条件。近年来,大量的研究表明miRNAs能够参与植物花色素苷的合成代谢,但在苹果果实中miRNA对于果皮红色形成的关键作用仍不清晰。本文选取‘斯托拉夫’苹果果实和‘王林’愈伤组织为试材,通过高通量测序的方法,找到了光诱导下参与花色素苷代谢调控的关键miRNA,并对其功能进行了验证,得到如下结果:(1)对‘斯托拉夫’苹果果实进行不同光照强度处理,之后进行高通量测序,筛选得到表达差异显著的8个miRNAs,已知miRNAs有3个,其中以miR7125表达差异最为显著。(2)miR7125和靶基因Md CCR在不同光照时间处理下和不同组织中的表达量呈现负相关的关系。对于苹果果实进行套袋处理时,苹果果实不着色,miR7125表达量显著降低,Md CCR表达量显著增加。对于苹果果实进行光照处理时苹果变红,miR7125表达量显著提高,Md CCR表达量降低。(3)构建miR7125过表达和沉默载体进行果实中的瞬时转化,发现过表达miR7125能够诱导花色素苷的积累;相反沉默miR7125时果皮不着色。(4)通过BLI试验验证发现MdMYB1与MdMYB16均能够结合在miR7125启动子CAACAG元件上,且MdMYB1与miR7125启动子结合更强。(5)构建MdMYB16过表达和沉默载体进行果实中的瞬时转化,发现MdMYB16与miR7125的表达量呈现负相关的关系,且沉默MdMYB16促进花色素苷积累从而促进苹果着色,而过表达MdMYB16苹果果皮不着色。(6)MdMYB16能够结合木质素路径基因MdF5H启动子,直接调控木质素的合成,进而间接影响花色素苷含量。