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目的观察齐墩果烷三萜类化合物CDDO-Me对C57BL/6小鼠放射性肺炎和肺纤维化的治疗效果,并对其作用机制进行初步探讨。方法选择6-8周龄C57BL/6雌性小鼠88只,分为放射性肺炎组和放射性肺纤维化组。炎症组小鼠随机分为四组,空白对照组、CDDO-Me组、单纯照射组和照射+CDDO-Me组,每组12只;纤维化组分组同炎症组,每组10只。采用瓦里安直线加速器6MV-X射线对小鼠右侧胸腔进行单次单前野照射,炎症组照射剂量为12.5 Gy,纤维化组照射剂量为22.5Gy,空白对照组和CDDO-Me组小鼠只麻醉不照射。炎症组中的照射+CDDO-Me组和CDDO-Me组分别于照射前1天和照射后第1、3、5天给予600ng CDDO-Me灌胃,纤维化组中的照射+CDDO-Me组和CDDO-Me组分别于照射前1天和照射后第1、3、5、7、9天给予600ng CDDO-Me灌胃,炎症和纤维化组的空白对照组和单纯照射组于相同时间点给予等容量生理盐水灌胃。炎症组于照射后3周,每组取6只小鼠,取右肺上叶部分进行HE染色观察肺组织病理变化,右肺中叶肺组织匀浆用ELISA方法检测细胞因子TGFβ1、IL-6和IL-10的水平,剩余肺组织匀浆用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,q PCR)方法检测前纤维化因子α-SMA、Col1a1和FN m RNA表达。每组另外6只小鼠,对右肺进行肺泡灌洗,右肺肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,用BCA方法检测BALF蛋白含量。纤维化组于照射后12周处死小鼠,用q PCR方法检测纤维化标志物α-SMA、Col1a1和FN m RNA表达,Masson染色观察肺纤维化病理改变,用碱水解法测定肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量。结果(1)病理检查显示,炎症和纤维化组中的照射+CDDO-Me组小鼠肺组织损伤程度较单纯照射组明显减轻,肺炎评分和纤维化Ashcroft评分显示出显著性差异,P值均<0.001;(2)ELISA检测结果显示,单纯照射组肺组织炎症因子TGFβ1、IL-6、IL-10水平较空白对照组显著升高,P值均<0.001,照射+CDDO-Me组TGFβ1、IL-6水平较单纯照射组明显下降,P值均<0.05,照射+CDDO-Me组IL-10水平较单纯照射组升高,P<0.01;(3)BALF检测结果显示,单纯照射组与空白对照组比较,BALF细胞总数、炎性细胞(中性粒细胞和淋巴细胞)所占比例及蛋白含量均显著升高,P值均<0.001,照射+CDDO-Me组与单纯照射组比较,BALF细胞总数、炎性细胞比例及蛋白含量均明显降低,P值均<0.01;(4)q PCR方法检测炎症和纤维化各组前纤维化因子α-SMA、Col1a1和FN m RNA表达水平,结果显示,单纯照射组三种因子的m RNA表达水平较空白对照组明显升高,P值均<0.001;照射+CDDO-Me组三种因子m RNA表达水平较单纯照射组显著下降,P值均<0.05。(5)肺组织Hyp测定结果显示,单纯照射组Hyp含量较空白对照组明显升高,P<0.001,照射+CDDO-Me组Hyp含量较单纯照射组显著下降,P<0.001。结论(1)本课题成功建立了小鼠放射性肺炎和放射性肺纤维化的模型;(2)CDDO-Me对小鼠放射性肺炎有明显的改善作用;(3)CDDO-Me对小鼠放射性肺损伤有明显的抗纤维化作用;(4)CDDO-Me能够降低肺组织中TGFβ1水平,可能是其发挥发挥抗炎和抗纤维化的作用的一个机制;CDDO-Me治疗放射性肺损伤的作用机制有待进一步研究。