论文部分内容阅读
本研究以哈白兔为实验动物,通过3H对氨基酸进行标记处理,采用同位素示踪、放射免疫等测定技术,运用房室分析经典理论方法,通过研究同位素标记物3H-Lysine在哈白兔体内的的吸收、分布、转化、代谢和排出的动态变化规律,以期探讨蛋白质在动物体内的生物转化过程。进而通过注射外源性CNT研究蛋白质代谢过程中,外源性CNT对血液的主要生理生化指标的变化,外源性CNT对与蛋白质代谢有关的主要激素的变化,探索外源性CNT对动物体内蛋白质代谢的调控机理,构建CNT代谢动力学模型。通过研究CNT对小动物哈白兔体内蛋白质代谢调控机理,为进一步探讨和实验CNT对大型动物牛、羊体内蛋白质代谢调控提供理论依据和技术方法。研究结果如下:1. 3H-Lysine在动物体内的代谢可用一级吸收二室模型来描述,对一般的二室模型进行了改良,并拟合出了最佳动力学方程,其决定系数R2=0.9989;拟合最佳二室模型。通过3H-Lysine的皮下注射后,同时进入中央室和周围室,中央室占了99.62%,随着在中央室内的消除和与周围室进行可逆性运转,达到平衡状态。进而从血液中迅速向各组织转运,直到30h左右时,又处于平衡状态,以后通过组织慢慢消除。2.组织样测定结果表明,正常生理条件下3H-Lysine在转运过程中除一部分随代谢排出体外,多数参与蛋白质合成而沉积于肾脏、心、肝脏、肌肉、脾等组织或器官中。皮下注射CNT后一些组织或器官内的3H-Lysine含量出现了明显变化(p<0.05)。cAMP组中则多沉积与肌肉、胃、肝脏、心脏、生殖器;cGMP组中膀胱、肌肉、肺脏、肠、脂肪;cGMP+cAMP组中多沉积与肌肉、膀胱、生殖器、脂肪、胃。3.经测定,动物体内血液内源性cGMP浓度为22.72 pmol/mL,cAMP浓度为88.84 pmol/mL,cAMP/cGMP为3.91;外源性CNT能有效提高内源CNT水平,单独注射外源性cGMP可使内源性cGMP和cAMP分别增加7.40pmol/mL和17.20pmol/mL,增加率分别为32.54%和19.36%;单独注射cAMP可使内源性cGMP和cAMP分别增加3.05pmol/mL和34.50pmol/mL,增加率分别为13.41%和38.84%;混合注射1:1的cGMP和cAMP可使内源性cGMP和cAMP分别增加4.42pmol/mL和22.79pmol/mL,增加率分别为19.42%和25.66%。另外,可以得知单独注射cGMP可以明显提高内源性cGMP的水平,而且在注射后45h以内效果最佳;单独注射cAMP可以明显提高内源性cAMP的水平,而且在4d或者更长时间会持续有效。4.经测定,动物体内血液生长激素浓度均大于对照组(13.89 ng/mL),cGMP组、cAMP组和混合组的平均浓度分别为19.84 ng/mL、24.38 ng/mL和20.34 ng/mL,平均增幅为42.90%、75.61%和46.50%,较对照组均达到显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)差异,三者提高GH水平的幅度在28.41%～64.27%、25.71%～114.00%和29.90%～73.93%之间。胰岛素含量较对照组(586.48μg/mL)有不同程度的变化,cAMP组、cGMP组和混合组的平均浓度分别为706.30μg/mL、495.67μg/mL和636.42μg/mL,平均变化率为20.43%、-15.48%和8.51%。结果表明,血液中胰岛素水平受cAMP的正调控(上升)和cGMP的负调控(下降)。睾酮含量较对照组(146.96ng/mL)有不同程度的变化,cAMP组、cGMP组和混合组的平均浓度分别为433.81 ng/mL、24.38ng/mL和234.91ng/mL,平均变化率为195.18%、-83.41%和59.85%。较对照组均达到显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)差异,三者提高睾酮水平的幅度在43.23%～330.22%、-79.62%～-87.41%%和23.13%～154.12%之间。5.正常状态下,动物血蛋白平均含量为8.37mg/100mL,单独cGMP处理后血脂水平平均增幅为5.62%,cAMP平均增幅为4.66%,cGMP+cAMP混合组平均增幅为6.81%,三个处理组的曲线均呈现波浪型变化,且变化幅度、频率基本一致,说明注射外源性CNT使血液中血蛋白浓度升高,加快了血蛋白的运输和利用;正常状态下,动物血糖平均含量为80.11mg/100mL,单独cAMP处理后血糖含量平均仅有1.79%的增加,而经过cGMP处理后的血糖含量平均增幅为10%,促进血糖动员和利用。