酚积累影响费约果组织培养褐化效应研究

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费约果(Feijoa sellowiana Berg.),又名肥吉果、菲油果,是桃金娘科、费约果属常绿灌木或小乔木,是一种集食用、药用、观赏等为一体的新兴果树。费约果能够适应四川绵阳地区气候,并能保持其果实品质和观赏特性,是一种极具发展潜力的树种。然而目前国内还没有系统的费约果苗木繁育技术和基地,为了促使费约果产业快速发展,尽快实现大面积推广和规模化栽培,费约果的苗木繁育技术研究显得格外重要与紧迫。本文对3个品种费约果的1年生幼嫩茎尖进行了组织培养,并对各处理下组培茎尖进行了总酚和总黄酮含量的分析,试寻求总酚和总黄酮与费约果组培褐化之间的关系。初步得出以下结论:(1)通过对外植体进行不同消毒时间处理,观察并统计其7d和30d的污染率、褐化率、愈伤率,比较不同消毒时间对3个品种费约果茎尖组培的影响,分析了它们之间的差异。结果表明,3个品种中Opal Star污染率和褐化率最低,消毒时间中6min污染率和褐化率最低,愈伤组织诱导率最高。(2)通过不同消毒时间的对比,筛选出最佳消毒时间0.1%生汞消毒6min,在MS培养基中添加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导。其中Coolidge的污染率和褐化率最低,Opal Star的愈伤率最高。四种培养基中,1号培养基MS+6-BA 1.0 mg/L污染率最低;4号培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L褐化率最低;3号培养基MS+6-BA 2.0mg/L愈伤率最高。(3)以费约果1年生幼嫩茎尖作为外植体,将其在无菌条件下经消毒接种在添加了抗氧化剂抗坏血酸(Vc)的4种愈伤组织诱导培养基中,以不添加任抗氧化剂的处理作为对照,经过30d培养统计其污染率、褐化率、愈伤率。结果表明,在四种培养基中添加抗氧化剂Vc对于1号培养基MS+6-BA 1.0 mg/L和2号培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0mg/L褐化的抑制效果最为明显,其中1号培养基MS+6-BA 1.0 mg/L褐化率降低幅度最大。3个品种中Coolidge褐化的抑制效果最为明显。(4)消毒时间对费约果组培茎尖总酚和总黄酮含量的影响较为明显,而且总酚和总黄酮的含量梯度较为相似。总体来看,3min消毒时间总酚和总黄酮含量最高,9min消毒时间总酚和总黄酮含量最低,9min消毒时间有抑制总酚和总黄酮产生的作用。(5)培养基对费约果组培茎尖总酚和总黄酮含量的影响较为明显,3个品种中Unique在4号培养基总酚和总黄酮含量最高,3号培养基总酚和总黄酮含量最低;Coolidge在3号培养基总酚和总黄酮含量最高,2号培养基总酚和总黄酮含量最低;Opal Star在3号培养基总酚和总黄酮含量最高,4号培养基总酚和总黄酮含量最低。总体来看3号培养基MS+6-BA2.0 mg/L总酚和总黄酮含量最高,2号培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA1.0mg/L总酚和总黄酮含量最低。(6)添加Vc对费约果组培茎尖总酚和总黄酮含量的影响较为明显,其中对2号培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0mg/L影响最大,2号培养基中Unique和Coolidge总酚和总黄酮含量均有降低,Opal Star的总酚和总黄酮含量均增加。其他培养基中添加Vc后总酚和总黄酮的含量都有一定程度的降低,其中Unique降幅最大,但Coolidge在四种培养基中都呈现了降低的趋势,在3个品种中趋势最为稳定。(7)影响组织培养褐化的因子很复杂,本文通过对Unique、Opal Star、Coolidge3个品种的茎尖组培褐化率和组培茎尖总酚、总黄酮含量进行相关回归分析得出,总酚含量与褐化率呈显著正相关(0.01<P<0.05),总黄酮含量与褐化率呈极显著正相关(P<0.01),表明酚类物质的含量对费约果茎尖组培褐化有较明显的影响,随着组培褐化率的增加,总酚和总黄酮含量也随之增加。
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