蜘蛛多肽毒素cDNA克隆与序列分析以及敬钊缨毛蛛毒素组学研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:txsliwei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  本文采用RACE法克隆了虎纹捕鸟蛛和敬钊缨毛蛛中六种多肽毒素HWTX-Ⅲ,HWTX-Ⅲa,HWTX-Ⅺ,JZTX-Ⅴ,JZTX-Ⅺ和JZTX-ⅪⅤ的cDNA。根据毒素的氨基酸序列设计RACE的引物,通过叠合3RACE和5RACE扩增的序列就得到了毒素蛋白的cDNA全序列。它们都由5UTR、开放阅读框和3’UTR组成,其开放阅读框编码一个信号肽区域,一个成熟蛋白区域和一个介于它们之间的pro区域构成的毒素前体。   序列分析的结果表明HWTX-Ⅲ,HWTX-Ⅲa与HWTX-Ⅰ,HWTX-ⅣHWTX-Ⅴ,SHL-Ⅰ的cDNAprepro区域高度相似,推测这六种毒素可能是从同一个祖先蛋白进化而来。HWTX-ⅪcDNA序列的prepro区域和其它已克隆出来的虎纹捕鸟蛛cDNAprepro区域很不一致,表明HWTX-Ⅺ属于虎纹捕鸟蛛毒素中发现的新毒素超家族。   敬钊缨毛蛛毒素cDNA的prepro区变化较大,且它们的同源性较低。JZTX-Ⅺ和JZTX-Ⅴ的cDNA序列C端成熟蛋白之后,终止密码子之前分别多余了Gly-Lys和Gly残基.推知它们的C末端氨基酸残基存在酰胺化修饰。   在蜘蛛毒液中发现含有丰富的肽类毒素,这些毒素在药理学和神经生物学研究上已得到了广泛的应用。本文在已有的工作基础上开展了对敬钊缨毛蛛(ChilobrachisJingzhao)毒腺的毒素组学研究。蜘蛛粗毒经分子筛层析分离后,以分子量14,000Da为界分为两部分冻干,将分子量低于14,000Da的毒素进行离子交换和反相色谱分离。分子量低于14,000Da的毒素经阳离子离子交换柱后,共收集12个离子交换蜂,分别编号为C0,C1,C2...C11。每个离子交换蜂上C18反相柱脱盐分离,其对应的各洗脱峰编号为C0R1,C0R2...C0Rn,C1R1....C1Rn...C11Rn。质谱鉴定各成份的分子量,对其中的单一成份进行Edman测序及活性测定。本文报道从该粗毒中用质谱共鉴定了150个左右肽类毒素分子。其中分离纯化并得到氨基酸序列的共有15个毒素成分,本文对这些成分进行了部分活性分析。采用RACE方法获得11个多肽毒素全长cDNA序列。这些为敬钊缨毛蛛毒素组数据库构建打下了基础,也将有利的推动对蜘蛛毒素的研究。
其他文献
由于图像信息丰富、数据量大,从存储图像和处理的角度来看,数字图像的庞大数据对计算机的处理速度、存储容量都提出很高的要求;从实时性要求和传送图像的角度来看,在信道带宽、通
目的 分析通过联合检测HbA1c、FBG、GLU、TG、LDL-C对于2型糖尿病患者的诊疗价值.方法 随机抽取2017年1月~2019年12月我院40例2型糖尿病患者和40名体检健康者并分组,两组均接
热休克蛋白(HSP)广泛存在于各种原核及真核生物细胞中。当组织细胞在受到某些有害刺激时,HSP及其基因表达可迅速增加,在机体应激反应防御机制中具有重要的意义。一般情况下
目的 探讨糖尿病视网膜病变采取激光联合药物疗法产生的临床疗效.方法 选择2016年1月至2018年12月至我院治疗的108例糖尿病视网膜病变患者当做研究对象,并以抽签法将其均等划
本文回顾了长扁甲科分类研究的历史和现状,描述了长扁甲的外部形态特征和生物学,总结了我国长扁甲科化石的研究历史、现状及化石产地的基本情况。文中整理研究了首都师范大学
探地雷达测试技术是利用电磁波来探测地表之下的目标或确定不可视物体的内部结构的一种方法。探地雷达的应用范围很广,在国民经济建设中发挥了重要的作用。现有的探地雷达大多
目的 讨论眼底激光联合雷珠单抗治疗糖尿病视网膜病变的临床效果.方法 本次研究选取样本数量为60例,选取人群为糖尿病视网膜病变患者,样本选取时间为2017年2月-2018年5月,对
目的 分析急性脑梗死患者应用依达拉奉联合长春西汀治疗的临床疗效.方法 选取我院收治的急性脑梗死患者108例为研究对象,遵循随机对照原则将其分为对照组(n=54)和观察组(n=54
Salinity is one of the most important abiotic stresses that adversely affects crop growth and productivity. A subtractive suppression hybridization(SSH) library
目的 研究硫酸镁冷敷贴对缓解产妇乳房肿胀的效果.方法 选取我院母婴分离的剖宫产分娩的100列产妇作为研究对象,随机分为观察组和对照组,对照组采用低频脉冲刺激乳房+电动吸