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背景与目的:卵巢癌是一种妇科常见的恶性肿瘤,其致死率是妇科肿瘤中最高的。目前公认的卵巢癌的治疗方法是以手术、化疗为主的综合治疗方法,但是,多药耐药、副作用大的问题使治疗的临床效果不尽人意。近年来,随着超声医学的发展,人们发现低强度超声联合声敏物质对肿瘤细胞有明显的杀伤作用,且穿透力强,对正常组织毒副作用小,选择性强,声动力疗法有望发展成为一种新兴的肿瘤治疗方法。声敏物质是开展声动力疗法的一个关键。亚甲蓝是一种染料,同时具有光敏性,是第二代光敏剂。最新研究表明,亚甲蓝能增强超声对肿瘤细胞的杀伤力,可能是一种潜在的声敏剂,但是具体的机制有待阐明,本文拟在探讨亚甲蓝介导声动力疗法对卵巢癌细胞HO-8910的杀伤效应和杀伤机制,同时观察其对HO-8910细胞转移能力的影响。材料与方法:用倒置显微镜观察和台盼蓝染色法了解亚甲蓝声动力作用后HO-8910细胞的生长状况;用Hoechst33258细胞核荧光染色法和流式细胞仪Annexin V-FITC/PI染色的细胞凋亡检测亚甲蓝声动力作用对HO-8910细胞凋亡的影响并找到凋亡最明显的时间段;用透射电镜观察亚甲蓝声动力作用后HO-8910细胞超微结构的变化;通过Rhodamine123染色用CLSM观察并半定量分析HO-8910细胞线粒体膜电位的变化情况;通过DCFH-DA染色检测HO-8910细胞内活性氧的生成情况;通过转移实验(细胞克隆、侵袭、迁移、粘附实验)检测HO-8910细胞转移能力。结果:亚甲蓝以100μM与HO-8910细胞共同孵育1h后,再以0.46 W/cm2×5 s的超声辐射,对HO-8910细胞的杀伤率明显高于单纯超声处理组,单纯亚甲蓝处理组没有毒性作用;倒置显微镜下观察,亚甲蓝声动力处理组的细胞数量明显减少,细胞皱缩,漂浮,并可见大量细胞碎片;Hoechst33258细胞核荧光染色显示亚甲蓝声动力组在处理后6 h出现尤为明显的细胞凋亡现象:细胞核凝聚,凋亡小体出现;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI染色检测HO-8910细胞凋亡率在处理后6 h发现亚甲蓝声动力组细胞早期凋亡率为7.91%,坏死或晚期凋亡率达18.17%;透射电镜在处理后6 h观察到在亚甲蓝声动力组细胞凋亡小体形成;Rhodamine123染色在处理后6h显示亚甲蓝声动力组细胞内线粒体膜电位降低;DCFH-DA染色在处理后3 h内检测显示,亚甲蓝声动力组的ROS含量明显增多;细胞克隆实验显示,亚甲蓝声动力组的克隆形成率较其它组明显降低;细胞粘附实验显示,亚甲蓝声动力组的粘附抑制率为68.35%,较其它组明显增高;细胞侵袭、迁移实验显示,在亚甲蓝声动力组,穿膜细胞数较其它组明显减少。结论:亚甲蓝声动力作用对HO-8910细胞具有明显的杀伤效应,并且其具显著的凋亡诱导作用;细胞内ROS增多导致线粒体的损伤可能是亚甲蓝声动力作用后细胞凋亡的重要原因;亚甲蓝声动力作用对HO-8910细胞的转移能力有明显的抑制作用。因此,亚甲蓝是一种有效的新型声敏剂,具有推广和应用价值;亚甲蓝声动力治疗可作为卵巢癌的一种新型治疗模式。