尽管细胞DNA每天受到来自内源和环境中一些因素的不断攻击,人体基因并未成为一堆乱码信息或降解。为了应对这种威胁,生命体已经发展了多种系统来检测DNA损伤,发出信号并介导其修复,从而使人体能够恢复DNA的完整性和保真度,并保持基因组的遗传稳定性。DNA修复途径的破坏或失控会导致基因组不稳定,因此,阐明DNA损伤修复的机制对于维持基因组稳定性和遗传信息的完整性至关重要。细胞周期进程和DNA损伤修复共同帮助细胞内遗传物质的稳定。PALB2(Partner And Localizer Of BRCA2)是重要的乳腺癌抑制因子,作为BRCA2的协同因子,帮助BRCA2定位在DNA损伤位点。PALB2作为核心蛋白连接BRCA1和BRCA2,促进同源重组修复(HR)。RCC1(Regulator Of Chromosome Condensation 1),染色质浓缩调控因子1,与核小体上的H2A/H2B结合,参与S晚期和M早期的染色质凝聚。DNA损伤应答(DDR)中许多损伤修复因子发挥作用和细胞周期进程依赖Ran-GTPase调节的核质交换(NCT),RCC1是Ran唯一的鸟嘌呤交换因子,与Ran结合,促进Ran-GDP转换成Ran-GTP,RCC1作为染色质浓缩调节因子参与调控染色质的浓缩,染色质的浓缩状态与DNA损伤修复进程密切相关。首先,我们通过免疫共沉淀方法发现是PALB2是RCC1的一个新的相互作用的蛋白。为了确定PALB2与RCC1相互作用的关键结构域,我们将PALB2野生型及缺失突变体质粒转染293T细胞,通过免疫共沉淀进一步发现两者之间的相互作用依赖于PALB2的P11(aa.692-759),缺失了PALB2的P11片段能够破坏两者之间的相互作用。并且我们构建出RCC1部分缺失突变体质粒D1-D3。接下来我们研究了PALB2,RCC1及Ran敲低之后对组蛋白乙酰化的影响。我们通过si RNA转染U2OS细胞,分别敲低细胞内的PALB2,RCC1或者Ran的表达后,检测了一系列H2A和H2B上不同位点的赖氨酸发生乙酰化的表达水平变化,发现细胞内敲低PALB2,RCC1或者Ran之后,H2BK12ac,H2BK15ac,H2BK20ac的表达水平与对照组相比都有显著的降低。此外,敲低了RCC1和Ran之后,H4K16ac的表达水平明显降低。综上所述,我们初步验证了RCC1和PALB2之间的相互作用以及RCC1、PALB2和Ran对组蛋白H2BK12ac、H2BK15ac、H2BK20ac和H4K16ac表达水平的调控机制,为深入研究RCC1和PALB2如何协同参与DNA损伤修复打下了基础。