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副干酪乳杆菌是干酪乳杆菌的一个亚种,常见于健康人体肠道,自然发酵乳制品及其它发酵产品中,该菌种有很强的耐NaCl、耐酸及耐胆汁盐能力,某些菌株还有抗过敏作用,在我国,对其研究较少。本研究拟从传统发酵乳制品中分离筛选优良性状的乳酸菌,通过形态学、生理生化特征、耐受性及分子生物学方法进行系统鉴定,同时进行分离株对小鼠免疫调节作用的研究,为丰富我国益生菌菌株资源及副干酪乳杆菌的研究和应用提供科学依据,奠定理论基础。以民间多种发酵奶制品和保健品为材料,从中分离出31株细菌,其中12株符合乳酸菌的性状。通过菌株对NaCl、酸和胆汁盐的耐受能力,筛选出LP2、LP4和LP9三株优良菌株,经形态学和生理生化鉴定,三株菌与副干酪乳杆菌性状一致。进一步的胃肠道模拟环境耐受性试验表明,菌株LP2和标准菌CICC20241在pH 3.0,0.3%胆汁盐,10 mg/mL胃蛋白酶和10 mg/mL胰蛋白酶环境下处理24h后均保持了90%以上的存活率,耐受性最强。根据GeneBank(FJ607300)发表的Lactobacillus paracasei 16S rDNA基因序列,设计并合成一对特异引物,采用PCR技术扩增出LP2的16S rDNA片段,序列测定与分析结果表明,LP2与GenBank中Lactobacillus paracasei EU676339同源性为99.6%,进一步从分子水平上鉴定了分离菌株LP2为副干酪乳杆菌。对菌株LP2和CICC20241进行了免疫调节功能的研究。选用ICR小鼠分成4批共360只,雌雄各半随机分为对照、低剂量、中剂量和高剂量4个剂量组,其中低、中、高剂量组每天灌喂不同剂量重悬于10%脱脂乳中的LP2和CICC20241,对照组每天灌喂等量的10%脱脂乳,试验周期为3周。结果表明,绵羊红细胞诱导小鼠迟发型变态反应(DTH),中、高剂量组24h足跖增厚均高于对照组,并有显著性差异(P<0.05),中高剂量组之间无显著性差异(P>0.05); LP2中、高剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖力均高于对照组,有极显著性差异(P<0.01),高剂量组极显著高于中剂量组(P<0.01),CICC20241高剂量组有显著效果;两菌株处理的小鼠,高剂量组自然杀伤(NK)细胞活性极显著高于其它组(P<0.01),LP2中剂量组显著高于对照组(P<0.05)。LP2和CICC20241均具有较强的免疫调节作用。