链霉菌(Streptomyces SP103)发酵液抗菌活性的物质基础研究

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研究表明,有些植物内生真菌由于长期与宿主共处,有可能产生与宿主相同或相似的活性物质,也可能产生有利于增强宿主抵抗力的活性物质。因此,本文以黄山采集来的千层塔为原料,进行了内生真菌的分离、活性菌株的筛选以及初步探讨了其生物活性的物质基础,具体研究内容如下:(1)从千层塔中分离到87株内生真菌,其中67株菌株的发酵液对四种病原真菌(苹果轮纹、苹果炭疽、小麦赤枯、油菜菌核)有抑制作用,其中,对小麦赤枯、苹果轮纹、苹果炭疽和油菜菌核具有抑制作用的菌株所占的比例分别为:42.5%、40.2%、60.9%和57.5%。(2)选取活性较好的菌株Streptomyces SP103,用发酵罐发酵,将发酵液离心,分为发酵液和菌丝体,采用生长速率法测定了其对病原真菌的相对抑制率。发酵液对苹果轮纹和油菜菌核的相对抑制率最好,几乎看不到菌丝生长,其相对抑制率为100%;对苹果炭疽和小麦赤枯的相对抑制率也分别为83.4%和81.3%。(3)采用柱层析、薄层层析等分离手段对Streptomyces SP103发酵产物的不同部位进行分离,并追踪各部分的生物活性,活性部位主要为80%乙醇部分和乙酸乙酯萃取部分(C3和D3)。(4)通过硅胶柱层析、薄层层析、凝胶(Sephadex LH-20)层析等方法,从发酵液中分离到了3个化合物,通过1HNMR、GC-MS等光谱技术鉴定了其中的3种化合物,分别为苯甲酸苄酯、山萘酚、7H-6,9a-Methano-4H-cyclopenta[9,10]cyclopropa[5,6]cycl-odeca[1,2-d]-1,3-dioxin-13-one,6,6a,7a,8,9,12,12a,12b-octahydro-12,12a-dihydroxy-2,2,7,7,9 ,11-hexamethyl-,[6R-(6.alpha.,6a.alpha.,7a.alpha.,9.alpha.,9a.alpha.,12.beta.,12a.beta.,12b.alp ha.)]。
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