“通经调形”推拿法治疗早期中风后肢体痉挛的临床疗效及效应机制研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linnber
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目的:通过“通经调形”推拿法治疗早期中风后肢体痉挛患者,评价其对中风后肢体痉挛患者痉挛程度改善情况、运动功能、生活自理能力的影响。并基于谷氨酸-谷氨酰胺循环观测中风后肢体痉挛大鼠通过推拿干预后对兴奋性递质Glu的影响,分析“通经调形”推拿法对中风后痉挛的作用机制,为临床治疗提供理论参考。方法:1临床试验:课题选用随机对照研究方法,将72例早期缺血性中风后肢体痉挛患者随机分成试验组和对照组,试验组运用“通经调形”推拿法治疗,对照组采用运动疗法治疗。治疗时间每日1次,一周5次,连续治疗4周。治疗前后选用改良Ashworth痉挛量表(modified Ashworth scale,MAS)、简化的Fugl-Meyer评定量表(Fugl-Meyer motor assessment,FMA)、改良Barthel指数(modified Barthel index,MBI),对患者痉挛程度、运动功能及生活能力进行评估。所有数据结果使用SPSS 28.0软件进行分析。2动物实验:将50只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术10只、模型和推拿组各20只,采用线栓法建立脑缺血再灌注模型,造模成功后随机分为模型组和推拿组。推拿组在大鼠造模24h后进行治疗,按揉督脉,点按患侧曲池穴、阳陵泉、委中穴、合谷穴、太冲穴,治疗7d,其余2组常规喂养,不予处理。(1)“通经调形”推拿法对中风后肢体痉挛大鼠行为学的影响。三组大鼠分别于造模后24h及治疗7d后进行Zealonga评分、改良Ashworth痉挛评分、网屏实验及大鼠肌张力检测,观察各组大鼠行为学评分差异及肌张力变化。(2)“通经调形”推拿法对中风后肢体痉挛大鼠皮层神经元损伤及星形胶质细胞的影响。治疗结束取材后,取三组大鼠脑组织进行TTC染色观察脑梗死体积,尼氏染色检测皮层神经元损伤情况,免疫双染观察皮层A1型星形胶质细胞(神经毒性标记物C3)/星形胶质细胞活化(GFAP)的情况。(3)“通经调形”推拿法对中风后肢体痉挛大鼠AKT-m TOR信号通路的调控作用及其与Glu水平关系的研究。采用生化试剂盒测定Glu的浓度,通过蛋白免疫印迹Western blot和荧光定量PCR测定AKT、m TOR、GLT-1在大鼠皮层的表达情况。结果:1临床试验:治疗前,两组受试者性别、年龄、痉挛侧别、改良Ashworth评分、Fugl-Meyer运动功能评定量表、改良Barthel指数评分无统计学差异(P>0.05)。两组患者治疗后改良Ashworth评分较治疗前均有效降低上下肢痉挛程度(P<0.001),试验组在上肢痉挛程度的改善方面优于对照组(P<0.05)。经Fugl-Meyer量表评定,“通经调形”推拿法肢体运动功能恢复情况优于运动治疗组(P<0.05);改良Barthel指数评分评定,试验组提高受试者生活能力优于对照组(P<0.05)。2动物实验:(1)推拿治疗7d后,推拿组Zea-longa评分低于模型组(P<0.05);推拿组与模型组改良Ashworth评分相较,痉挛情况明显改善(P<0.01);推拿组网屏实验评分较模型组比显著降低(P<0.05);大鼠肌张力测定结果显示:假手术组治疗前后,肌张力无明显变化。造模24h后,模型与推拿两组肌张力升高,两组分别与假手术组比较存在明显差异(P<0.001)。治疗7d后,推拿组与模型组比较存在统计学差异。(2)TTC染色结果显示:假手术组未见梗死灶,与假手术组相比,模型组与推拿组存在明显局灶性梗死(P<0.001),推拿组与模型组相比,推拿组梗死体积显著减小(P<0.01)。尼氏染色结果显示:假手术组大鼠神经元数量多、胞体大,排列规整;模型组大鼠神经元数量减少,排列不规整且与周围细胞间隙增宽;推拿组皮层神经元数量、形态、排列、间隙等存在不同程度的恢复。免疫荧光定量双染结果显示:推拿组与模型组相比,推拿组C3/GFAP阳性细胞比率明显降低(P<0.001)。(3)通过生化实验试剂盒测定谷氨酸浓度,推拿组与模型组相比,大鼠皮层Glu蛋白浓度降低(P<0.05)。通过Western Blot测定各组大鼠皮层神经元内AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR、GLT-1蛋白表达情况。模型组与假手术组相比,皮层中AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR、GLT-1蛋白呈低表达状态(P<0.01),推拿组与模型组比较,皮层中p-AKT、AKT、m TOR、p-m TOR、GLT-1的表达呈高表达的状态(P<0.05)。通过PCR实验方法测定,在各组大鼠大脑皮层中AKT m RNA、m TOR m RNA、GLT-1 m RNA的表达变化中,推拿组与模型组相比,AKT m RNA、m TOR m RNA、GLT-1m RNA的表达明显升高(P<0.05)。结论:临床试验:“通经调形”推拿法治疗可降低早期中风后肢体痉挛患者的痉挛程度,尤其在改善上肢痉挛程度临床疗效上优于常规运动疗法,有助于患者肢体运动功能的恢复,提高患者日常生活能力。动物实验:“通经调形”推拿法可修复中风后肢体痉挛大鼠皮层神经元损伤,减缓脑损伤级联反应对星形胶质细胞的活化作用,可能是通过激活AKT-m TOR通路上调GLT-1蛋白的表达,从而降低大鼠脑皮层内Glu的浓度,减少兴奋毒性对神经元的损伤,有助于纠正神经递质紊乱,有效改善痉挛程度,降低肌张力。
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