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目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对胶质瘤细胞增殖、分化的影响,并探讨胶质瘤细胞中Pin1与Notch1信号的相关性。 方法: 1.CCK-8法检测ATRA对胶质瘤细胞系U251和U87增殖的抑制作用。 2.细胞免疫荧光染色法检测ATRA处理后U251和U87细胞中GFAP的表达情况。 3.Western blotting检测ATRA处理后U251和U87细胞中Pin1、Notch1、Hes1、MDR1和MRP1表达。 4.细胞免疫荧光染色法检测ATRA处理后U251和U87细胞中Pin1、Notch1、Hes1的表达。 5.用Pin1基因表达载体转染U251、U87细胞,获得Pin1高表达的U251和U87细胞(U251-pin1和U87-pin1),经Western blotting鉴定后,检测其Notch1和Hes1的表达情况。 结果: 1.CCK-8实验结果表明ATRA对U251和U87细胞均有增殖抑制作用,并且这种抑制作用有明显的时间-剂量依赖性。 2.免疫荧光染色结果显示ATRA处理后,U251和U87细胞中GFAP的表达均高于对照组细胞,提示ATRA能够诱导胶质瘤细胞分化。 3.Western blotting结果表明ATRA处理后的U251和U87细胞中Pin1、Notch1、Hes1、MDR1和MRP1的表达均下调。 4.细胞免疫荧光染色结果显示ATRA处理后的U251及U87细胞中Pin1、Notch1和Hes1的表达均减弱。 5.Western blotting结果显示高表达Pin1的转染细胞(U251-pin1,U87-pin1)中Notch1和Hes1表达亦上调。 结论: 1.ATRA能够诱导神经胶质瘤U251和U87细胞分化,抑制细胞增殖。 2.ATRA抑制Pin1的表达进而下调Notch1及下游靶分子Hes1的表达,ATRA还可抑制胶质瘤细胞中多药耐药蛋白MDR1和MRP1的表达。