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热休克蛋白（Heat shock proteins,HSP）是普遍存在于各类生物体中的一类应激蛋白,当生物体受到环境中各种物理、化学等因素刺激时就会产生应激反馈合成该类蛋白质,从而增强自身抵抗力,降低外界刺激对机体的伤害。中华鲟（Acipenser sinensis）为国家I级水生保护动物,其本身没有维持体温恒定的生理机制,所以它们的代谢容易受到外界温度的影响,尤其是高温季节养殖中华鲟易患多种细菌性疾病,给该物种的保护研究带来巨大挑战。本研究通过RACE和同源序列比对克隆、鉴定在温度应激中起重要调控作用的中华鲟HSP30蛋白和HSP70蛋白家族基因,分析其序列特征和系统进化关系,并研究其在高温胁迫和细菌感染条件下的组织表达特征,为研究该基因在应对温度胁迫和细菌感染中的功能奠定基础。1.HSP30蛋白基因的克隆及其在高温胁迫下的表达分析克隆了中华鲟热HSP30蛋白基因的全长,分析其分子结构与特征,并研究了其在高温胁迫下的表达水平。结果表明,中华鲟HSP30蛋白基因cDNA序列全长为1037 bp,其中开放阅读框（ORF）636 bp,5’端非编码区（5’UTR）38 bp,3’端非编码区（3’UTR）363 bp,共编码211个氨基酸。氨基酸多序列比对发现含有一个保守的α晶状体结构;系统进化分析显示,中华鲟HSP30与其它鱼类HSP30聚为一支,与小体鲟HSP30氨基酸序列相似度最高,为79%。荧光定量PCR结果表明,中华鲟HSP30蛋白基因在各组织中表达,其中在皮肤中的表达量最高,肝脏次之,肠中的表达量最低。高温胁迫后,心脏、脾脏、肾脏和皮肤中HSP30蛋白基因表达量均显著增加,表明这些器官在中华鲟应对高温胁迫中可能起重要作用。2.HSP70家族基因的克隆及其在高温胁迫、细菌感染下的表达分析克隆并鉴定了来自中华鲟HSP70家族的9个成员（命名为HSC70,HSP70-A1,HSP70-4,HSP70-4L,HSP70-12A,HSP70-12B,HSP70-12Blike,HSP70-13和HSP70-14）。对HSP70家族9个成员保守结构域的分析结果表明:所有HSP70家族成员均含有NBDsugar-kinaseHSP70actin超家族结构域,其中HSC70和HSP70-A1具有相同结构域（HSPA1-26-8-likeNBD）;HSP70-4和HSP70-4L具有相同结构域（HSPA4NBD）;HSP70-12A、HSP70-12B和HSP70-12B-like具有相同结构域（HSPA12-likeNBD）;HSP70-13和HSP70-14分别具有保守的结构域HSPA13-likeNBD和HSPA14-likeNBD。系统进化分析结果表明,中华鲟HSP70家族的9个成员在系统发育树中分布在5个不同的分支,且含有相同结构域的成员分布在同一分支。荧光定量PCR结果表明,HSP70家族的9个成员在检测的中华鲟6种组织中（肝、肾、脾、肠、脑和皮肤）均有表达,且在不同组织中的表达量存在明显差异。高温胁迫和嗜水气单胞菌感染后,HSP70家族的9个成员在中华鲟脾脏和肾脏中的表达量均显著增加,表明HSP70家族成员可能在维持机体正常生理状态及应对外界温度胁迫和病原菌侵染中起着重要作用。