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目的:利用电化学酶传感器来检测分析环境中有机污染物具有了简便快捷特点。本研究采用顺序注射分析法(SIA)的丝网印刷型酶传感器联用技术,检测辣根过氧化物酶(horseradish peroxidas,HRP)和漆酶的催化电流,反映苯酚类等有机污染物的浓度。为环境污染物快速测定提供了一种准确,灵敏及自动化的检测技术。方法:实验研究中以单位点HRP,漆酶丝网印刷电极和四位点(HRP,漆酶)丝网印刷电极为基础,利用牛血清白蛋白(BSA)和戊二醛形成的交联大分子将HRP,漆酶或两种酶与锇聚合物(锇-聚乙烯基吡啶,Os(bpy)2(PVP)10Cl2,Os-PVP)的混合酶液分别固定于单位点丝网印刷电极和四位点电极的表面,采用顺序注射分析(SIA)与丝网印刷生物传感器联用法对各种酶电极进行检测分析,并对其缓冲液pH值及浓度、泵流速、样品量等实验条件进行优化。结果:(1)对单位点,无Os-PVP修饰的HRP电极,游离铁氰化钾修饰的漆酶电极检测分析中,优化得到最佳条件分别为①HRP电极:泵流速153.9μL/min、样品量100μL、0.1 mol/L ,pH 6.5的PBS缓冲液,HRP催化邻苯二胺(OPD)-H2O2反应时,H2O2浓度变化的电流响应线性方程为y=14.59+114.61x,R2=0.9845,电流响应灵敏度为110.11 nA/ (mmol/L),OPD浓度变化的电流响应线性方程为y = 27.595x + 17.925,R2=0.9941,电流响应灵敏度为26.88 nA/ (mmol/L)该酶电极重现性良好,RSD为3.8%,用于实际水样加标回收率测定时,回收率大于60%。②游离铁氰化钾修饰的漆酶电极:0.1 mol/L ,pH 4.5 PBS缓冲液,漆酶催化邻苯二酚与铁氰化钾的电流响应线性方程为y=49.7x+17.582,R2=0.9827,电流响应灵敏度为50 nA/ (mmol/L),呈现良好的线性关系。(2)对单位点及Os-PVP修饰的HRP,漆酶电极检测分析,在最适的PBS缓冲液条件0.1mol/L,pH分别为7.5,4.5下,HRP催化OPD-H2O2反应的电流响应线性方程为y=300.39x-6.7031,R2=0.9875,电流响应灵敏度为97.46 nA/ (mmol/L);漆酶催化邻苯二酚反应的电流响应线性方程为y=1.166x+0.078,R2=0.9801,电流响应灵敏度为1.13μA/ (mmol/L)。HRP-(Os-PVP)电极用于实际水样加标回收率为70 % 93 %。漆酶-(Os-PVP)电极用于检测垃圾滤液,其中含邻苯二酚浓度的平均值为0.028 mmol/L,标准偏差(RSD)为0.34%。(3)四位点酶电极的分析中按照HRP,漆酶,HRP,漆酶的顺序将酶分别与Os-PVP混合后固定于丝网印刷电极表面,得到在最适PBS缓冲液(0.15 mmol/L,pH 6.0 )条件下,同H2O2,邻苯二酚共同反应的电流响应线性方程分别为1位点(HRP):y=1.572x-0.165,R2=0.9559,电流响应灵敏度为1.44μA/(mmol/L);2位点(漆酶):y=0.5519x-0.023,R2=0.949,电流响应灵敏度为0.54μA/ (mmol/L);3位点(HRP):y=1.022x+0.01,R2=0.9604,电流响应灵敏度为0.91μA/ (mmol/L);4位点(漆酶):y=0.349x-0.0042,R2=0.9641,电流响应灵敏度为0.33μA/ (mmol/L)。对垃圾滤液中含邻苯二酚浓度检测结果浓度分别为1.09 mmol/L,,1.02 mmol/L,1.04 mmol/L,1.09 mmol/L,平均值为1.05 mmol/L,相对偏差(RSD)为3.4%。结论:建立了一种顺序注射分析法与丝网印刷型酶传感器联用技术及对四位点酶电极的研究。该联用技术提高了传感器分析的精确度和灵敏度及利于在线长期实时的检测环境;四位点酶电极的研究为复杂的环境检测手段扩宽了检测范围及选择性。