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目的：在建立多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）大鼠模型的基础上，研究滋阴补阳序贯法对模型大鼠卵巢多囊样改变、排卵及分泌功能的影响，并从类固醇激素合成酶（3β-HSD、P450arom）、卵巢局部因子（IGF-Ⅰ）、卵巢激素受体（AR）表达等方面探讨其作用机理，从而为临床应用滋阴补阳序贯法治疗PCOS提供实验依据，有助于阐释中医药治疗PCOS的作用途径和靶点，为中药调整生殖节律提供可靠的实验依据，并赋予“中药调整月经周期”理论新的内涵。方法：选用21日龄SD雌性大鼠70只，随机分为7组，分别为正常对照组、模型组对照组、滋阴组、补阳组、序贯组、西药组及联合用药组，每组10只。23日龄始正常对照组每日皮下注射芝麻油0.2ml，其余各组每日皮下注射DHEA 6mg／100g体重+0.2ml芝麻油混合剂，连续注射20天，建立DHEA诱导的大鼠PCOS模型。造模结束次日按照上述分组分别给予相应药物，正常对照组灌服生理盐水；模型对照组灌服生理盐水；滋阴组灌服滋阴方；补阳组灌服补阳方；序贯组先灌服滋阴方连续2日，然后灌服滋阴补阳合方连续2日；西药组灌服二甲双胍；联合用药组中药给药方法及剂量同序贯组，加用二甲双胍，给药方法及剂量同西药组。各组连续给药12日。末次给药后禁食过夜，翌日动物称重，眼眶后静脉丛采血，分离血清，置-20℃冰箱保存，待化学发光法测定T、E2，放射免疫法测定A、FSH、LH、INs和IGF-Ⅰ。将动物断头处死，剖腹，摘取双测卵巢。观察卵巢形态、色泽，秤重并记录卵巢重量。取一侧卵巢行光镜观察，部分卵巢进行透射电镜观察，另一侧卵巢采用RT-PCR法测定3β-HSD、P450arom、IGF-Ⅰ和AR mRNA表达。结果：1．卵巢大体解剖观察结果：正常对照组大鼠卵巢色泽较红，模型对照组卵巢表面较苍白，体积增大，表面可见囊状扩张的卵泡。模型对照组卵巢重量显著高于正常对照组（P＜0.01）；序贯组卵巢重量较模型对照组明显减轻（P＜0.01）。2．卵巢光镜观察结果：多裳卵巢大鼠卵巢见囊状扩张的卵泡，黄体数量较少；用药后除补阳组外其余各组囊泡直径均明显减小（P＜0.05，P＜0.01）；序贯组和联合用药组黄体数量明显增加，提示滋阴补阳序贯法治疗后卵巢PCO状态的改善和排卵功能的恢复。3．卵巢电镜观察结果：电镜下正常对照组颗粒细胞和卵泡膜细胞胞质内含中量的线粒体、粗面及滑面内质网、脂滴和微管等，而模型对照组颗粒细胞和卵泡膜细胞胞质内可见大量的线粒体、粗面及滑面内质网、脂滴等。经滋阴补阳序贯治疗后颗粒细胞和卵泡膜细胞内线粒体、滑面内质网和脂滴数量明显减少。4．血清A、T、E2、FSH、LH、INS、IGF-Ⅰ水平测定结果：模型对照组血清A和T水平较正常对照组明显升高（P＜0.01），用药后各治疗组均有显著下降；序贯组降低A的作用优于滋阴组和补阳组（P＜0.01），与西药组和联合用药组比较无显著差异（P＞0.05）；序贯组降低T的作用优于补阳组和西药组（P＜0.01，P＜0.05），与滋阴组和联合药用组比较无显著差异（P＞0.05）。PCOS模型大鼠E2水平明显升高（P＜0.05），给药后除滋阴组外其它组E2水平均有显著下降（P＜0.05，P＜0.01）。提示滋阴补阳序贯法可以降低模型大鼠异常升高的血清卵巢激素水平。模型对照组血清FSH、LH水平与正常对照组比较差异无显著性（P＞0.05）。模型对照组血清INS水平较正常对照组明显升高（P＜0.05）；序贯组、西药组和联合用药组较模型对照组明显降低（P＜0.01，P＜0.05），滋阴组、补阳组与模型对照组比较无显著差异（P＞0.05）；其中序贯组血清INS水平明显低于滋阴组和补阳组（P＜0.01），与西药组和联合用药组比较无显著差异（P＞0.05）。提示滋阴补阳序贯法与二甲双胍具有降低胰岛素水平的作用，滋阴补阳序贯法明显优于单纯滋阴或补阳。模型对照组血清IGF-Ⅰ水平较正常对照组明显升高（P＜0.05）；补阳组、序贯组、西药组和联合用药组较模型对照组明显降低（P＜0.01），滋阴组与模型对照组比较无显著差异（P＞0.05）；其中序贯组血清IGF-Ⅰ水平明显低于滋阴组（P＜0.05），与补阳组、西药组和联合用药组比较无显著差异（P＞0.05）。提示滋阴补阳序贯法具有降低血清IGF-Ⅰ水平的作用，且优于滋阴组。5．大鼠卵巢3β-HSD、P450arom、IGF-Ⅰ、AR mRNA表达水平模型对照组大鼠卵巢3β-HSD、P450arom、IGF-Ⅰ、AR mRNA表达水平与正常对照组比较均显著升高（P＜0.05，P＜0.01），滋阴补阳序贯法能够降低上述类固醇激素合成酶、卵巢局部因子及激素受体的表达水平，而且其作用优于单纯滋阴或补阳。结论：1、成功建立了DHEA诱导的PCOS大鼠病理模型，对该模型从卵巢形态学、内分泌学等方面进行了研究，表明其病理形态和血清激素水平均与PCOS非常相似，且存在高胰岛素血症。因此，认为本模型是一种比较理想的研究PCOS的动物模型。2、滋阴补阳序贯法能够改善PCOS大鼠卵巢多囊样改变及排卵障碍状况；可以减少PCOS大鼠卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞内增多的线粒体、滑面内质网和脂滴数量，提示其可能通过对颗粒细胞和卵泡膜细胞超微结构的影响，降低PCOS大鼠血清雄激素水平。3、滋阴补阳序贯法能够降低PCOS大鼠血清异常升高的A、T、E2水平，逆转其内分泌紊乱状态。4、滋阴补阳序贯法使PCOS大鼠血清INS、IGF-Ⅰ水平降低，提示其可能通过降低血清INS、IGF-Ⅰ水平，从而减少卵巢A、T、E2的合成。5、滋阴补阳序贯法使PCOS大鼠卵巢3β-HSD、P450arom mRNA表达水平下降，提示其通过抑制卵巢类固醇激素合成酶的表达，从而减少A、T、E2的合成。6、滋阴补阳序贯法使PCOS大鼠卵巢IGF-ⅠmRNA表达水平下降，提示其通过减少卵巢局部因子IGF-Ⅰ表达，从而减少卵巢雄激素的合成。7、滋阴补阳序贯法使PCOS大鼠卵巢ARmRNA表达水平下降，提示其通过下调卵巢AR的表达，逆转卵巢局部AR介导的自分泌／旁分泌功能亢进状态，减轻过高的雄激素对卵巢局部的作用，从而改善模型大鼠的PCO状态，抑制过高的卵巢激素的合成。8、滋阴补阳序贯法改善卵巢功能的作用优于单纯的滋阴或补阳，具体体现在对PCOS大鼠卵巢黄体数的影响，对血清A、T、E2水平的影响等方面。